人r 兔异种核移植构建克隆胚的实验研究Experimental Research on .PDF

动 物 学 研 究 ， （）： !# $% ’ !( ) )*( + )!* ,- #. + *)/ 0 122- !#) + #3#. 455657896 :;;9=8 人 兔异种核移植构建克隆胚的实验研究 ! 季静娟，郭通航，童先宏，骆丽华，周桂香，傅应云，刘雨生 （安徽医科大学 附属省立医院生殖中心，安徽 合肥 #$$$ %） ： 摘要 “治疗性克隆”是人类最关注的课题之一，而人体细胞核移植是治疗性克隆的基础和前提。异种核 移植的方法虽已被引入人体细胞克隆胚的构建，但供体细胞的类型、培养代数及准备方法与其效率之间的关系 尚有待探讨。本实验以不同培养代数和不同准备方法的人卵丘细胞、皮肤成纤维细胞和软骨细胞为供体构建了 克隆胚，对其发育情况的比较表明，以卵丘细胞为供体时重构胚的体外发育率高于其余二者，差异显著 （ ! $ ’$( ）；不同培养代数的成纤维细胞克隆胚和不同冷藏天数供体细胞克隆胚体外发育率无明显差异。此外，本 实验还尝试用荧光原位杂交法检测所构建的异种克隆胚核遗传物质的来源，结果显示来自人体细胞。本研究表 明，人! 兔异种核移植构建克隆胚切实可行；体细胞的类型与核移植效率相关；供体细胞的体外培养传代对克 隆胚的发育并无影响；而冷藏是一种简便有效的供体细胞准备方法；此外，用)*+, 方法对重构胚进行核遗传 物质的鉴定切实可行。 关键词：治疗性克隆；核移植；体细胞核移植；异种克隆胚胎 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） -.%# / $(0 ! (.(# $$( $0 ! $0 %1 ! $1 ?@A;=7B;CD96 :;;9=8 5C D; ,5CD=%8D75C 5E ,65C;F ?BG=H5 I=5% J%B9CK=9GG7D 1CD;=KA;87; -%86;9= I=9CE;= ! !#$%’()$ * +,- ./$% 0)$% * .-1+ 2#)$ 0/$% * 3,- 3# 0() * 45-, +(#6#)$% * 7, 8#$%9($ * 3, 8(:0;$% #$%$’ ( )’ *$+ ’),-./0$ 1$,/./%$ 2 3%4-/ 1$,/.56 7%/0$’8/9 3(( /6/5$, !’)0/%./56 :)8+ /56 2 :$( $/ #$$$ % 2 #4/%5; $GD=98D L 234567489:; ;=:? :@ =4 =A =85 B6C=5 54@465;3 =DC4;9:E4@ F 6G 934567489:; ;=:? :@ D6@4G = 38B6 @=H B69:; ;4 8;465 956@A45 I 23=8?3 :945H@74;:4@ 8;465 956@A45 36@ D44 :95=G8;4G 9= ;=@958;9 38B6 @=B69:; ;4 ;=4G 4BD5J=@ F 934 4AA4;9@ =A 9J74 F 76@@6?4 6G = B493=G =A G==5 ;4@ = 4BD5J= G4E4=7B49 54B6: 9= D4 G4945B:4G I * =85 4K745:B49 F ;=4G 4BD5J=@ L454 54;=@958;94G L:93 G:AA454