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试验七生化需氧量的测定
实验七 生化需氧量的测定
(BOD)是指在规定的条件下,微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量,用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量,是反映有机物污染的重要类别指标之一。测定BOD的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。该方法也称五天培养法(BOD5),即取一定量水样或稀释水样,在20℃±1℃培养五天,分别测定水样培养前、后的溶解氧,二者之差为BOD5mg/L表示,其相关内容参阅教材第二章第八节。
1.掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2.复习第二章第八节中的相关内容,提出为保证测定准确度,应当控制好哪些条件。
二、仪器
1.恒温培养箱。
2.5~20L细口玻璃瓶。
3.1000~2000mL量筒。
4.玻璃搅拌棒:棒长应比所用量筒高度长200mm,棒的底端固定一个直径比量筒直径略小,并有几个小孔的硬橡胶板。
5.溶解氧瓶:200~300mL,带有磨口玻璃塞,并具有供水封用的钟形口。
6.虹吸管:供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂
1.磷酸盐缓冲溶液:将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4),2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4),33.4g
磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中,稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。
2.硫酸镁溶液:将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中,稀释至1000mL。
3.氯化钙溶液;将27.5g无水氯化钙溶于水,稀释至1000mL。
4,氯化铁溶液;将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水,稀释至1000mL。
5.盐酸溶液(0.5mol/L):将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水,稀释至100mL。
6.氢氧化钠溶液(0.5mol/L):将20g氢氧化钠溶于水,稀释至1000mL。
7.亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3=0.025mol/L);将1.575g亚硫酸钠溶于水,稀释至1000mL。此溶液不稳定,需每天配制。
8.葡萄糖-谷氨酸标准溶液;将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH)在103℃干燥lh后,各称取150mg溶于水中,移入1000mL容量瓶内并稀释至标线,混合均匀。此标准溶液临用前配制。
9.稀释水:在5~20L玻璃瓶内装入一定量的水,控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵,将此水曝气2~8h,使水中的溶解氧接近于饱和,也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布,置于20℃培养箱中放置数小时,使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL,并混合均匀。稀释水的pH值应为7.2,其BOD5应小于0.2mg/L。
10.接种液:可选用以下任一方法获得适用的接种液。
(1) 城市污水,一般采用生活污水,在室温下放置一昼夜,取上层清液供用。
(2) 表层土壤浸出液,取100g花园土壤或植物生长土壤,加入1L水,混合并静置10min,取上清溶液供用。
(3) 用含城市污水的河水或湖水。
(4) 污水处理厂的出水。
(5) 当分析含有难于降解物质的废水时,在排污口下游3~8km处取水样做为废水的驯化接种液。如无此种水源,可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气,每天加入少量该种废水,同时加入适量表层土壤或生活污水,使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物,或检查其化学需氧量的降低值出现突变时,表明适用的微生物已进行繁殖,可用做接种液。一般驯化过程需要3~8天。
11.接种稀释水;取适量接种液,加于稀释水中,混匀。每升稀释水中接种液加入量为:生活污水1~10mL;表层土壤浸出液为20~30mL;河水、湖水为10~100mL。接种稀释水的pH值应为7.2,BOD5值以在0.3~1.0mg/L之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。
四、测定步骤
1.水样的预处理
(1) 水样的pH值若超出6.5~7.5范围时,可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节至近于7,但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高,可改用高浓度的碱或酸液进行中和。
(2) 水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时,可使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释,或提高稀释倍数,降低毒物
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