靛玉红吲哚 3 取代物对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响 - 江苏大学.PDF

第２５卷第１期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２５ Ｎｏ．１ 　 ２０１５年１月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｊａｎ．２０１５ 　 　 　 　 　 　 靛玉红吲哚３取代物对肝癌 ＨｅｐＧ２细胞 生物学行为的影响及其机制 １ １ １ １ １ ２ 谈德斐 ，郭文洁 ，夏娟 ，管廷尉 ，高静 ，姚其正 （１．江苏大学药学院，江苏 镇江２１２０１３；２．中国药科大学药学院，江苏 南京２１０００９） ［摘要］　目的：研究新合成的靛玉红衍生物吲哚３取代物Ａ的体外抗肿瘤作用及可能机制。方法：以不同浓度的 吲哚３取代物Ａ作用于ＨｅｐＧ２细胞，ＭＴＴ法检测细胞活力；观察ＨｅｐＧ２细胞的集落形成；ＤＡＰＩ染色观察细胞核的变 ２＋ 化；ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ双染检测细胞凋亡率；分别采用ＪＣ１和Ｆｌｕｏ３／ＡＭ染色检测ＨｅｐＧ２细胞线粒体膜电位和胞内Ｃａ 含量；蛋白质印迹检测Ｂｃｌ２、Ｂａｘ的表达和Ｃａｓｐａｓｅ３、９的活化。结果：吲哚３取代物Ａ对ＨｅｐＧ２细胞的抑制作用呈 时间浓度依赖性，且可抑制ＨｅｐＧ２细胞克隆集落的形成。吲哚３取代物Ａ作用于ＨｅｐＧ２细胞后，细胞表现出明显的 核固缩、碎裂等凋亡特征，ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ双染结果显示 ＨｅｐＧ２细胞出现明显的凋亡，细胞凋亡相关的Ｃａｓｐａｓｅ３、９活 化也明显增加。同时，吲哚３取代物Ａ处理可降低Ｂｃｌ２的蛋白表达水平，提高Ｂａｘ的蛋白表达水平，呈浓度依赖性。 此外，吲哚３取代物Ａ能降低线粒体膜电位并诱发细胞内钙离子超载。结论：吲哚３取代物Ａ能够诱导ＨｅｐＧ２细 胞出现明显的细胞凋亡，其机制可能与损伤线粒体，活化线粒体介导的细胞凋亡通路密切相关。 ［关键词］　靛玉红吲哚３取代物；抗肿瘤；细胞凋亡；线粒体 ［中图分类号］　Ｒ７４９．１６　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７１－７７８３（２０１５）０１－００３８－０５ ＤＯＩ：１０．１３３１２／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１７７８３．ｙ１４０２４６ Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｎｏｖｅｌｉｎｄｏｌｅ３ｄｅｒｉｖａｔｅｉｎｄｉｒｕｂｉｎｏｎｈｕｍａｎＨｅｐＧ２ ｃｅｌｌｓａｎｄｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍ １ １ １ １ １ ２ ＴＡＮＤｅｆｅｉ，ＧＵＯＷｅｎｊｉｅ，ＸＩＡＪｕａｎ，ＧＵＡＮＴｉｎｇｗｅｉ，ＧＡＯＪｉｎｇ，ＹＡＯＱｉｚｈｅｎｇ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＺｈｅｎｊｉａｎｇＪｉａｎｇｓｕ２１２０１３；２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｊｉａｎｇｓｕ２１０００９，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｎｏｖｅｌｉｎｄｏｌｅ３ ｄｅｒｉｖａｔｅｉｎｄｉｒｕｂｉｎｉｎｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨｕｍａｎＨｅｐＧ２ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｅｘｐｏｓｅｄｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｉｎ ｄｏｌｅ３ｄｅｒｉｖａ