镁缺失对玉米幼苗发育及生理特性的影响.doc

缺镁对玉米幼苗发育及生理特性的影响的探究 摘要：本次实验旨在研究缺镁对玉米发育及生理特征的影响。本次实验使用缺镁培养液以及完全培养液对比培养玉米幼苗，培养三周后，观察两组玉米幼苗外部形态特征，测定了植物光合作用速率，根系活性，过氧化酶活性，叶绿素含量等9项具体指标，在对比实验分析中得到结果。缺镁植株老叶从叶尖前端开始失绿，并逐渐向叶基部扩展，呈现黄绿色相间的条纹，糖含量低，光合作用能力低，叶绿素含量显著降低。根系活力和代谢活性均很弱。 关键词：缺镁；玉米；生长发育；生理特性. 引言： 玉米是我国北方主要栽培作物之一，在当前市场经济迅速发展的过程中，玉米是改善人民生活出口外贸重要的物质之一，对发展农业、畜牧业具有十分重要的意义[1]。为了提高玉米的产量和品质，在农业栽培技术和作物育种上开展各种研究的同时，掌握作物个体发育中对外界环境条件营养物质需要也是极为重要的。 已有一些学者对植物缺素做了研究，关于玉米一生各时期所需要的营养和缺素症状已有大量的报导，本次实验们分别从缺素培养期间植物外观变化的观察，以及后期对于植物叶片，相关组织，根系等所做各项生理指标来测定。镁是可以转移的元素。当新叶合成需要时，转移到新叶部分，老叶由于缺素的原因首先表现出症状[3]，所以实验选择老叶进行测量。在实验的生理指标测定中，一共进行了9项测定，它们分别是：缺Mg对玉米组织细胞原生质膜的影响，光合作用的测定，根系活力测定，过氧化物酶测定，叶绿素含量测定，可溶性糖含量测定，硝态氮含量测定，蛋白质含量测定，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。通过上述9项生理指标的测定，初步了解缺Mg对于玉米生长发育的影响，并探究起理论依据。 1 材料与方法 材料 1.1.1材料与试剂 玉米(Zea mays L)，硝酸钾，硫酸镁、硝酸钙、硝酸钠、EDTA-Na2、微量元素、半饱和KCl溶液、0.1%TTC溶液、80%丙酮、1.0%硫酸铜、2.2%重铬酸钾、2N氨水、无水硫酸钠、石油醚（沸程60-90℃）、10% KOH的甲醇溶液 、0.2mol/L磷酸缓冲液(PBS)，pH7.0、0.3% H2O2、0.2%愈创木酚 (pH=7.0)、0.02mol/L KH2PO4提取液、凝胶贮液(0%Acry(0.8% Bis)、分离胶缓冲液(1.0mol/L Tris-HCI，pH8.8)、浓缩胶缓冲液(1.0mol/L Tris-HCI，pH6.8)、1%过硫酸铵(Ap)、10×电极贮存液、联苯胺染色母液、冰醋酸、蔗糖、1%琼脂、25%乙醇、30%丙烯酰凝胶储备液、分离胶缓冲液（1.5mol Tris-HCI，pH8.8）、浓缩胶缓冲液（1.0mol Tris-HCI，pH6.8）、. SDS电极贮存液（临用前稀释5倍）、染色液、蛋白质提取液、G-250 蛋白试剂、4(SDS凝胶加样缓冲液、饱和醋酸铅、草酸钠、80%酒精、蒽酮试剂、标准葡萄糖母液、1%醋酸、0.8mol/L 醋酸钠、锌粉、硝酸试剂、KNO3标准液 1.1.2仪器设备 培养缸、棉花、通气玻璃管、pH试纸、量筒(1000ml)、烧杯(1000ml)、吸球、电子天平；Lci便携式光合仪；电导率仪、真空干燥器、抽气机、恒温水浴锅、注射器、剪刀、小烧杯、纱布 1.2 方法 1.2.1 幼苗的培养 选取饱满的玉米种子或番茄种子，在28℃-30℃下浸泡24h，播于盛有湿润营养土培养盆中。在20℃-28℃下玉米培养8-10d，当幼苗长出第二片真叶时，便可作为溶液培养材料。 1.2.2 对照培养： 分别配制大量元素营养液和缺镁营养液。具体数据见表1。表中的参数是相对于1L的培养液而言，将pH调至pH5-6。 先将幼苗种于塑料盆中土壤培养。一周后，分为完全营养液和缺镁营养液两组，选取生长一致的玉米幼苗，去除胚乳后将地上部穿过培养缸盖的孔口，用少许棉花把植株固定。每个培养缸三株幼苗，剩下的一个孔口插入一只玻璃管，用于给培养液通气。移植完毕后，将培养缸放在玻璃温室中培养。 表1 玉米的完全培养液和缺镁培养液配置（ml/1L培养液） 贮备液 Ca(NO3)2.H2O K NO3 MgSO4.7H2O KH2PO4 Na2SO4 EDTA-Fe 微量元素 完全 5 5 5 5 － 5 1 缺Mg 5 5 － 5 5 5 1 1.2.3测定各项指标 （1）缺镁对植株外观形态的影响 ：在将玉米进行缺素培养时，同步观察玉米的症状，包括叶片颜色，症状首先出现部位，叶片形状，植株大小粗细等性状。 （2）缺镁对组织细胞原生质膜的影响：可以根据电解质外渗反映抗逆性，分缺素和完全叶片两组，每组取相同部位叶片0.5g剪成小片。分别加20ml蒸馏水浸没30min。搅拌，测得初始电导率(S1) 。转入100℃沸水中煮10min，冷却