联合应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠腹主动脉平滑肌细胞增生和凋亡影响.pdfVIP

联合应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠 腹主动脉平滑肌细胞增生和凋亡的影响 摘 要 目的:研究联用吡哆胺和替米沙坦对大鼠血压水平及血管平滑肌细胞增生及 凋亡的影响，探讨平滑肌细胞（VSMC）增生和凋亡与腹主动脉血管重塑的关系； 探讨晚期糖基化终末产物 （AGEs）及其受体 （RAGE）与肾素－血管紧张素系统 （RAS） 的关系；探讨AGEs－RAGE与RAS对血管重塑的影响及联用吡哆胺和替米沙坦的干 预效果。 方法: 选取22周龄雄性自发性高血压大鼠（SHR）48只，作为高血压实验组， 每组12只，随机分为4组：高血压对照组（HC组）蒸馏水2ml/d灌胃一次；替米 沙坦组（T 组） 替米沙坦 6mg/kg/d 灌胃 1 次；吡哆胺组（P 组）盐酸吡哆胺 200 mg/kg/d 灌胃 1 次；联合治疗组（TP 组）替米沙坦 6mg/kg/d 及盐酸吡哆胺 200 mg/kg/d 灌胃 1 次。同周龄雄性威斯塔京都大鼠（WKY）12 只，为正常对照组(NC 组) 蒸馏水2ml/d灌胃一次。每2周检测大鼠尾动脉收缩压1次。干预16周后， 取动脉血，分离血清，竞争性ELISA法测定血清AGEs，放射免疫法测血清AngII， 化学法测血清 NO、SOD 含量。HE 染色光镜下观察各组腹主动脉血管中膜结构的改 变。 TUNEL 法染色，计算各组腹主动脉切片凋亡指数(AI)。免疫组化检测血管平 滑肌PCNA，计算增殖指数（PI）。免疫组化检测细胞外信号调节激酶1、2（ERK1、 ERK2）的蛋白表达水平。实时定量 PCR检测腹主动脉的RAGE、AT1的mRNA水平。 结果： 1、大鼠尾动脉收缩压结果： 与 NC 组相比 HC 组收缩压明显升高(P0.01)；与 HC 组相比 T 组、TP 组收缩 压下降(P0.01)，P组收缩压无明显改变(P0.05 )；T组与TP组之间收缩压差异 无统计学意义(P0.05 )。 2、血清生物学指标检测结果： ①与NC组相比HC组血清NO、SOD浓度较低（P0.01）；与HC组相比T组、P组、 TP 组血清 NO、SOD 浓度升高（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组血清 NO、SOD 浓 度进一步升高（P0.05）。②与 NC 组相比 HC 组血清 AGEs 较高（P0.01）；与 HC 5 组相比T组、P组、TP 组血清AGEs浓度降低（P0.01）；与 T组、P组相比TP组 血清 AGEs 浓度进一步降低（P0.05）。③与 NC 组相比 HC 组血清 AngII 浓度较高 （P0.01）；T组与HC组相比血清AngII浓度升高（P0.05）；P组与HC组相比血 清AngII浓度降低（P0.05）；TP组与T组相比血清AngII浓度降低（P0.05）。 3、光镜下腹主动脉中膜观察结果： NC组血管VSMC排列整齐，细胞无明显增生肥大，细胞核大小较均一，血管壁 内膜光整，内弹力板排列规则，细胞外胶原纤维增生不明显， HC 组 VSMC 细胞排 列紊乱，细胞增生肥大，血管壁内膜不光整，弹力板受压、断裂和(或)弯曲，细 胞外胶原纤维增生增多。TP 组、P 组、T 组 VSMC 细胞排列、细胞增生、凋亡、血 管壁内膜完整性，弹力板受压、断裂情况，胶原纤维增生情况较HC组改善。 4、TUNEL法凋亡指数（AI）结果： 与NC组相比HC组AI较低（P0.01）；与 HC组相比T组、P组、TP组AI升高 （P0.01）；与T组、P组相比TP组AI进一步升高（P0.05）。 5、免疫组化PI、ERK1、ERK2结果： （1）与NC组相比 HC组PI（增殖指数）增高（P0.01）；与HC组相比T组、P组、 TP组PI降低（P0.01）；与T组、P组相比TP组PI进一步降低（P0.05）。 （2）与NC组相比 HC组ERKl升高（P0.01）；与HC组相比T组、P组、TP组ERKl 降低（P0.01）；与T组、P组相比TP组ERKl进一步降低（P0.05％）。 （3）与NC组相比 HC组ERKl升高（P0.01）；与HC组相比T组、P组、TP组ERKl 降低（P0.01）；与T