怀牛膝对兔骨性关节炎软骨组织影响实验的研究.pdf

目 录 I＼呲Y㈣21㈣00删658圆 ＼ 中文摘要……………………………………．．．．．……………………………………………．．I Abstract．…．…．．…．．．．．．．．……．．．…．…．………．……．………．…．．．．．…．…．．．…………．……．．．…．III 英文缩略词对照表…………………………………………………………………。VII 前 言………………………………………………………………………………………………．．1 实验一怀牛膝对OA模型兔膝关节软骨组织形态学的影响……………．．3 实验二怀牛膝对OA模型兔膝关节关节液中NOS、SOD活性的影响．．11 MMP．13 实验三怀牛膝对OA模型兔膝关节滑膜组织中MMP．3、 6 和TIMP．1的影响………………………………………………………1 实验四怀牛膝对OA模型兔膝关节软骨组织中IGF．1和Ⅱ型胶原蛋白的 影响………………………………………………………………………………………．21 讨 论……………………………………………………………………………………………．26 结j沧……………………………………………………………………………………………．33 参考文献………………………………………………………………………………．．34 综述一……………………………………………………………………………40 综述二…………………………………………………………………………．．47 附 图………………………………………………………………………………………………56 致 谢………………………………………………………………………………………………62 中文摘要 目的 观察骨关节炎模型兔膝关节软骨组织的病理生理变化，探讨怀牛膝对 骨关节炎模型兔膝关节软骨组织的作用机制，为中医药防治骨性关节炎的 实验研究与临床应用提供一些依据。 方法 新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、治疗组(怀牛膝)、对照组 (西乐葆)，其中治疗组分为怀牛膝高剂量、中剂量和低剂量三组。参照 Hul th造模法制作实验性兔骨关节炎模型。造模一周后开始给药，连续治 疗6周后取材，分别检测病灶软骨组织形态及病理生理学相关因子的变 化，具体分四个部分： 1采用组织化学法制备软骨组织标本及切片，在光镜和电镜下观察病 灶软骨组织形态学变化． 2在切开病灶膝关节之前抽取关节液，采用化学比色法检测关节液中 NOS、SOD的含量． 达，通过图像分析系统比较各组之间差异。 4运用免疫组织化学技术分别检测软骨组织IGF-1和Ⅱ型胶原，通过图 像分析系统比较各组之间差异． 结果 1组织形态学变化：正常组关节软骨组织表层光滑、平整，软骨细胞 分布均匀；模型组软骨组织表层明显变薄甚至消失，可见细胞簇集，软骨 细胞排列紊乱；治疗组中怀牛膝高、中剂量组和对照组软骨组织破坏程度 明显减轻，少数区域可见软骨细胞排列不规则；怀牛膝低剂量组和模型组 差别不大。各组软骨组织评分中模型组较正常组评分明显升高(P0．01)； 怀牛膝高、中剂量组和对照组较模型组显著降低(P0．01)；怀牛膝高、 中剂量组组间比较无明显差异，但分别较对照组存在差异；怀牛膝低剂量 组与模型组之间差异不明显(P0．05)．电镜下观察正常组软骨细胞基本 正常；模型组软骨细胞外形不规则，软骨细胞有固缩现象；怀牛膝高、中 剂量组软骨细胞轻度异常，部分出现空泡，胞浆内细胞器增多；且细胞损 伤程度好于对照组和怀牛膝低剂量组。 2关节液中NOS含量模型组较正常组明显升高(Po．01)；怀牛膝高、 中剂量和对照组较模型组均明显降低(P0．01)，且对照组和怀牛膝高剂 量组NOS含量低于中剂量组；怀牛膝低剂量组与模型组间无明显差异(P 膝高剂量组SOD含量高于中剂量，且两组均比模型组明显升高(P0．01)， 低剂量组和对照组与模型组比较差异不明显(PO．05)．