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天蚕抗菌肽A 与蜂毒素杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的克隆 - 遗传.PDF
( ) ( )
遗 传 HEREDITAS Beijin g 24 1 :31~34 ,2002 研究报告
天蚕抗菌肽 A 与蜂毒素杂合肽基因的合成及在
大肠杆菌中的克隆与表达
朱嘉明 ,刘飞鹏 ,李月琴 ,钟振宇 ,张 娜
( 暨南大学生命科学技术学院生物工程学系 , 广州 510630)
( ) ( )
摘 要 :根据天蚕抗菌肽 A cecropin A ,CA N 端第 1~7 个 氨基酸残基 、蜂毒素 melittin ,M N 端第 5~12 个氨基
( ) ( )
酸残基 , 以大肠杆菌偏爱的密码子设计合成了杂合肽 CA 1~7 - M 5~12 基因 , 同载体 p GEMEX - 1 连接后转化
大肠杆菌J M109 ,经打点杂交筛选和序列测定 ,获得一个与设计一致的克隆 。将此克隆中的质粒亚克隆至 J M103
(DE3) ,经 IPTG 诱导 、BrCN 切割和抑菌圈试验表明 ,克隆的杂合肽基因在J M109 (DE3) 中获得了表达 。
关键词 :天蚕抗菌肽 A ;蜂毒素 ;杂合肽
( )
中图分类号 :Q789 文献标识码 :A 文章编号 :0253 - 9772 2002 01 - 0031 - 04
Cloning and Expression of a Gene Encoding
Shortened Cecropin A - Melittin Hybrid in E . coli
ZHU Jiaming ,L IU Feipeng ,L I Yueqing ,ZHON G Zhenyu ,ZHAN G Na
( )
Depart ment of Biotechnology , College of L if e Scienceand Technology , Ji nan U niversity , Guangz hou 510630 , Chi na
Abstract :According to the studies of David Andreu and other scientists , we designed and synthesized a gene encoding
shortened cecropin A - melittin hybrid. This hybrid consists of CA ( 1 - 7) and M ( 5 - 12) . The gene was inserted into
p GEMEX - 1 in the site of EcoRI and B am HI. A positive clone was obtained by hybridization and DNA sequenc
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