可见分光光度计使用和调校.docVIP

可见分光光度计的使用与调校 一、仪器的检查 1、仪器处于工作状态时，光源发光应稳定无闪耀现象。当波长置于580时nm处时，在样品室内应能看到完整、清晰、均匀的黄色光斑。 如发出580nm处不是橙黄色光，则说明已造成光学系统位移，必须重新调整。打开盖板调整一螺杆，顺时针旋转波长变大，逆时针旋转波长变小。在调整时只须旋转很小幅度，调至白纸片上出现橙黄色光且波长盘上580nm处正好与红线对齐为止；亦可旋转波长盘至白纸片上出现橙黄色的单色光时，再松动波长盘上的三个螺钉，旋转波长盘使580nm处与盘上面的红线对齐。同时观察白纸片上光的颜色，若仍是橙黄色的单色光，表明已调好。 2、仪器光谱范围的两端波长处（有灵敏度换档开关的仪器可选在合适的灵敏度档次），光亮调节系统在其调节范围80%内调节时，应能使透射比达到100%。数显仪器在光量调节系统调节至最高限时，透射比应大于125%。 二、仪器的检定方法 1、稳定度 在仪器接收元件不受光的情况下，调整仪器零点，使显示值为0%，观察三分钟，记录透射比示值最大变化即为暗电流稳定度。 在仪器接受元件受光情况下，在400nm和700nm处，调整透射比为100%，观察3分钟（波长切换时五分钟），记录透射比示值最大变化即为光电流稳定度。 2、仪器波长检查 应用镨钕滤光片来作为标准，将镨钕滤光片装到仪器附件上放到一塑料比色皿座中，空白为空气即可，待仪器稳定后进行以下步骤： ① 打开比色皿盖，将面板上调“0”电位器调至 “0”刻线。 ② 将比色皿盖合下，使光电管受光，调节光量粗调(后细调)电位器至电表满度即“100％”，反复几次调整“0”和100”才能调好。每改变一次波长须重新校对“0”和“100％”，找出透射比最小的相应波长 ③ 将镨钕滤光片置于光路中，记下电表读数，然后在529nm左右分别测出其透射比。 注：镨钕滤光片有好几个不同波长的吸收峰，推荐用529nm的吸收峰来调整仪器波长。 3、吸收池配套性 吸收池磨砂面用铅笔编号，用蒸馏水在700nm处测定，将一个池的透射比值调至100%，测定其他吸收池的吸光度，若测定的吸光度为零或两格吸收池的吸光度相等，即为配对吸收池。 数据记录及处理 1、稳定度记录： 透射比示值变化最大值 0%处 100%400nm处 100%700nm处 2、仪器波长检查：测定529nm左右相对应的透射比记录， 529nm左右相对应的透射比 波 长 nm 透 射 比 τ% 5 3 3 5 3 2 5 2 9 5 2 6 5 2 5 3、吸收池配套性 （记录是否配套）