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遗 传 学 报，26(3):254-261,1999 ActaGeneticaSinica 转基因在玉米中的遗传分离 与整合特性的研究 王守才 王国英 丁群星① 张 宏②谢友菊 戴景瑞 中（国农业大学 北京 100094) 摘要 用PCR和DNA分子杂交方法研究了转基因Bt在3种不同方法获得的8个转化体后代 中的遗传分离、整合性质及其稳定性，结果表明：(1)转基因在大多数转化体后代中呈简单的 孟德尔遗传；在Rl至R2代，部分家系中转化体比例偏低，有的发生转基因丢失，但到R3代以后 均趋于正常的孟德尔遗传方式，在群体中固定下来；(2)转基因在不同转化体中的整合类型有 一定差异，但整合的位点和拷贝数都较少，且多呈串联或紧密连锁的整合；(3)在部分家系中 发现了个体间Southern杂交带型改变的现象，尤其在丁4的两个R。家系中表现较复杂。 关键词 玉米，Bt毒蛋白基因，转基因，遗传，整合 分类号 Q943 利用转基因技术进行作物品种改良已成为一种全新的育种途径，通过优良的外源基 因导人育种试材，可以取得突破性的育种进展。研究表明，转基因在许多转化体中都能稳 定整合，正常表达，并呈常见的孟德尔遗传，一〔’I，也有一些由于转基因整合的方式和拷贝数 不同，或者由于沉默、损伤或丢失导致不规则的遗传6〔.91，给转化体的利用造成困难。因 此，在转化完成后，搞清转基因的遗传方式，研究产生不稳定遗传的机理，将是转基因遗传 研究的重要课题。本文对3种不同转化方法获得的8个转Bt基因转化体及其后代的遗传 分离、整合特性及其稳定性进行了比较研究。 1材料和方法 所用的8个转化体 表（1)均来自本实验室的先期转化工作[10.11,”一”］，是用3种不同转 化方法在不同的遗传背景下转化成功的。 转化质粒pB48.415由中国科学院微生物所莽克强研究员提供[10［,13]，目的基因为经修 饰的苏云金芽抱杆菌 B（acillusthuringensis)的Bt毒蛋白基因(1（.8kb)，其表达产物对鳞翅 目等昆虫具有毒杀作用[12［10 转化体的检测采用Dotblotting,PCR引（物5-CCAGAATTCACGTTTCCGCTA-3’; 3-CCAAAAATATCTCAGGGC-5）和Southernblotting(EcoRI或Bg[I酶切1.2kb部分 本文于1997-06-25收到，1997-10-05修回 国家八六三计划和高等学校博士学科点专项科研基金资助项 目资（助号：930121) ① 现在中科院植物所工作 ② 现在中山大学工作 3期 王守才等：转基因在玉米中的遗传分离与整合特性的研究 255 表1转化体来源 Table 1Sourcesoftransformants 转化体名称 转化方法 亲本组成 Nameoftransformants Methodsoftranformation Parents 丁3 子房注射法 P136 Ding3 ovaryinjection 丁a 子房注射法 农大60 Dingo ovaryinjection Nongda60 Zi 超声波介导法 获白x莱1029 ultrasoundmediation HuobaixLai1029 乙 超声波介