第五章、真核细胞内膜系统和蛋白质分选.pptVIP

细胞内区室化是真核细胞结构和功能的基本特征之一，细胞内被膜区分为3类结构：细胞质基质、细胞内膜系统和其他由膜包被的各种细胞器（诸如线粒体、叶绿体、过氧化物酶体和细胞核）。 第二节、细胞内膜系统及其功能 一、细胞内膜系统的概述 二、内质网的形态结构与功能 三、高尔基体的形态结构与功能 四、溶酶体的形态结构与功能 四、溶酶体的形态结构与功能 溶酶体的形态结构与类型 溶酶体的功能 溶酶体的发生 溶酶体与过氧化物酶体 一、细胞质基质的涵义 用差速离心的方法分离细胞匀浆物中的各种细胞组分，先后除去细胞核、线粒体、溶酶体、高尔基体和细胞质膜等细胞器或细胞结构后，存留在上清液中的主要是细胞质基质的成分。 主要成分：中间代谢有关的数千种酶类，细胞质骨架结构。 主要特点：细胞质基质是一个高度有序的体系； 通过弱键的相互作用处于动态平衡。 蛋白质的修饰 辅酶或辅基与酶的共价结合 磷酸化与去磷酸化：调节蛋白质的生物学活性。 糖基化作用：主要发生在内质网和高尔基体。 对某些蛋白质的N端进行甲基化修饰——不易被细胞内的蛋白水解酶水解，使蛋白质在细胞中维持较长的寿命。 酰基化：一类是内质网上合成的跨膜蛋白在通过内质网和高尔基体的转运过程中发生的；一类是在诸如src基因和ras基因这类癌基因的产物上。 蛋白酶体由一个筒状的20S的催化核心和其两端各一个19S的调节部分组成，存在于细胞质基质或细胞核中。 内膜系统的生物学意义 形成了一些特定的功能区域和微环境(细胞内功能分化) ?合理使用资源 ?集团化管理 ?提高工作效率 动态性质 ?保证了膜结构的一致性 ?使细胞“青春常在” 在细胞匀浆和超速离心过程中，由破碎的内质网形成的近似球形的囊泡结构，称为微粒体。虽然这是形态上的人工产物，但在生化研究中常把它与内质网等同看待。 新生多肽的折叠与组装 不能正确折叠的畸形肽链或未组装的蛋白亚基从内质网腔转到细胞质基质，通过泛素依赖的降解途径被蛋白酶体降解。 内质网腔是非还原性的环境，极易形成二硫键。蛋白二硫键异构酶（protein disulfide isomerase，PDI）切断二硫键，帮助新合成的蛋白重新形成二硫键并处于正确折叠的状态。 结合蛋白（Binding protein，Bip）识别不正确折叠的蛋白或未组装好的蛋白亚单位，并促进它们重新折叠与组装。 蛋白二硫键异构酶和Bip等蛋白都具有KDEL 或 HDEL 4肽信号以保证它们滞留在内质网中。 高尔基体与细胞的分泌活动 RER上合成的蛋白质?进入ER腔?COPⅡ运输泡?进入CGN ?在medial Golgi中加工?在TGN形成分泌泡?运输与质膜融合、排出。 蛋白质的糖基化及其修饰 蛋白质糖基化的特点及其生物学意义 蛋白质的糖基化类型 蛋白质的糖基化及其修饰 蛋白聚糖的合成 参与植物细胞壁的形成 复杂的N-连接寡糖的加工过程 溶酶体的形态结构与类型 溶酶体是单层膜围绕、内含多种酸性水解酶类的囊泡状细胞器。其主要功能是进行细胞内的消化作用。 溶酶体是一种异质性（heterogenous）的细胞器 ，不同溶酶体的形态大小、甚至其中所包含的水解酶的种类都有很大的不同。 溶酶体的类型 ?初级溶酶体（primary lysosome） ?次级溶酶体（secondary lysosome） ?残余体（residual body） 高尔基体与细胞内的膜泡运输 初级溶酶体 60余种溶酶体的酶类，都属于酸性水解酶。 溶酶体的膜在成分上的特点： ?嵌有质子泵，形成和维持溶酶体中酸性的内环境； ?具有多种载体蛋白用于水解的产物向外转运； ?膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白的降解。 溶酶体的标志酶：酸性磷酸酶（acid phosphatase） 次级溶酶体 ?自噬溶酶体（autophagolysosome） ?异噬溶酶体（phagolysosome） 溶酶体的发生 信号序列的发现和证实 1972年Milstein及其同事用分离纯化的核糖体在非细胞体系中用编码免疫球蛋白轻链的mRNA指导合成多肽，发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免疫球蛋白在N端有一段多出的肽链，推测这段肽链具有信号作用。 Blobel、Dobberstein和Walter在上述发现的基础上用分离的微粒体和非细胞体系进行了大量的实验，进一步证实了信号序列的存在及其作用。 在非细胞系统中蛋白质的翻译过程与SRP、DP和微粒体的关系 由6种结构不同的蛋白和一个7S RNA（长约300bp）组成的复合物，SRP上有3个功能部位：信号肽识别结合位点（P54）、翻译暂停结构域（P9/P14）、SRP受