冷冻保存骨髓细胞方法的改进.pdfVIP

维普资讯 保存 毛7 7／。 中国应用生理学杂志 1993；9f2) 85 脂相隔后促使生长更多数量的红系集落。这一结果提 4 参考文献 示．贴壁层能生成可弥散的体液性造血活性因子，作 用干红系造血祖细胞而发挥其刺激作用cMFLSC的 lZhao SF．W u CT．Comparison ofthehemopoiefic 抑制作用则主要与细胞间近距离的负调控有关，实验 growth factorsproducedduring in vitrocultureof 中曾观察到，贴壁层细胞生长_状态或密度可影响其抑 mu and human fatalliver cells．Exp Hematol 制程度，贴壁层细胞越密，对红系集落生长的抑制越 l990；l8：367—71． 明显，贴壁层细胞稀疏时 则抑制作用不 明显 。本室 以 2赵士富 陈索佩，陶来宝 小鼠胎肝造血基质细胞系 往的工作表 明MFLSC贴壁层对 CFU—GM 生长同样 对 CFU—GM 生长的调控作用．中国应用生理 学杂 具有双 向调控作用 u] 造血基质细胞的双 向调控作 志 l991：7：l47—50． 甩在维持稳定的血细胞生长 中具有重要意义。 1g |。 冷冻保存骨髓细胞方法的改进 ． 笙垄墨 查±茎 鲍云华 俞受程一 t军事 医学许 学 院基 医学研 究所 北京 10085O) ． R 冷冻保存骨髓细胞和 自体骨髓移植是帮助需放疗 上清，用少量上清液调整细胞浓度为2×l0 ／ml，沉 和化疗的白血病病人和恶性肿瘤病人造血功能恢复的 降的红细胞立即回输给病人 。向已分离好的骨髓样 品 重要措施，已在Jl缶床工作 中受到重视 ，但 目前常用的 按 1：1比例加入含 20％DMSO 的 1640保护液 ．使 方祛冻存容积大，用代血浆分离的方法使细胞有一定 DMSO 的终浓度为 l0％，装入冷冻管 中冻存，(3)简 损失 … ，而且两者的二 甲基亚砜 (DMSO)用量均较 化组：94ml4C的 1640培养液 中加 66mlDMSO为冻 大，不利于给病人输注，我们采 用了一种简单的方 存液，待冻存液冷却至 4C时，将其册瓶壁慢慢加入 法，减 少了总的冻存体积，简化了操 作步骤，冻存后 到冷到 4℃的 500ml骨髓样品中，不断摇 匀，装^冷 的骨髓 细胞仍保持较 高活率，已在Jl缶床应用，效果 良 冻袋 中冻存，使 DMSO 的终浓度为 lO％，每袋装 好 。 50m l。 1．4 冻存 l 材料和方法 冷冻管装的样品置于试管架上 ，放 人冷冻箱 中， 1,1 罾髓的采集 冷冻袋装的样 品放人双层铁夹之中，在冷冻箱中铁夹 骨髓样品均来 自患实体瘤需进行大荆量放疗 或化 互相隔开。样 品用 WKL一3型冷冻仪接 1℃ ／min的 疗的病人，在手术宣内无菌条件下，从患者局麻的双 速 率 从 4C下 降到一40℃ ，保 持 20min，然 后按 侧髂骨 后作多方向的穿刺，每一穿刺点抽取骨髓 10-- 3℃ ／rain从一