胀果甘草提取物对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用-应用化学.PDF

第２９卷 第８期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．２９Ｉｓｓ．８ ２０１２年８月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ａｕｇ．２０１２ 胀果甘草提取物对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用  张麦茹　樊金玲 　朱文学　李　欣 （河南科技大学食品与生物工程学院　洛阳４７１００３） 摘　要　筛选胀果甘草是对蘑菇酪氨酸酶抑制活性最强的提取物，并研究其对蘑菇酪氨酸酶的抑制类型， 探究其抑制作用机理。考察了胀果甘草７种不同溶剂包括甘草酸、提酸废液、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正 丁醇及水提取物对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用和对２，２联氮双（３乙基苯并噻唑啉６磺酸）二胺盐（ＡＢＴＳ） · 自由基阳离子（ＡＢＴＳ ）、羟基自由基（ＨＯ·）的清除作用，根据双倒数曲线图形判断对蘑菇酪氨酸酶的 抑制作用类型，结合抗氧化能力探究对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用机理。在胀果甘草７种溶剂提取物中，以乙 酸乙酯提取物对蘑菇酪氨酸酶具有最强的抑制作用，ＩＣ 为３４７７５ｇ／Ｌ，双倒数曲线做图得到了一组纵轴截 ５０ · 距不变的曲线，抑制常数Ｋ为０６６６７ｇ／Ｌ，胀果甘草乙酸乙酯提取物也具有最强的清除ＡＢＴＳ 、ＨＯ·的能 １ ８ 力，半清除浓度和速率常数分别为００４４２ｇ／Ｌ和４６３４×１０Ｌ／（ｇ·ｓ）。胀果甘草乙酸乙酯提取物对蘑菇酪氨 酸酶的抑制作用是可逆竞争性抑制，推测其对酪氨酸酶的抑制是通过清除了氧自由基和作为竞争性底物而 实现的。 关键词　胀果甘草，蘑菇酪氨酸酶，ＡＢＴＳ自由基阳离子，羟基自由基，竞争性抑制 中图分类号：Ｏ６４３　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１２）０８０８９８０８ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１２．００３６２ 酪氨酸酶（ＥＣ１．１４．１８．１）是一种含铜的氧化还原酶，普遍存在于人和动植物体内，是黑色素生物 ［１３］ 合成过程中的关键酶和限速酶 。酪氨酸酶抑制剂通过抑制酪氨酸酶活性从而减少黑色素生成，不但 可作为美白剂用于化妆品，而且可用于色素增加性皮肤病（黄褐斑和雀斑等）的临床治疗，还可作为食 品添加剂用于控制果蔬及其产品的酶促褐变。 甘草（ＲａｄｉｘＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ）为豆科植物甘草属乌拉尔甘草（ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａＵｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．）、胀果甘草 ［４６］ ［７］ （Ｇ．ｉｎｆｌａｔａＢａｔ．）或光果甘草（Ｇ．ｇｌａｂｒａＬ．）的干燥根及根茎 ，是一种药食两用植物 。近来的研究 ［８１２］ 表明，甘草提取物对酪氨酸酶具有显著的抑制活性 。从光果甘草中发现的酪氨酸酶抑制剂有光甘 ［１３］ ［１４］ 草定 （活性为曲酸的１５倍）、光甘草烯、异甘草素 ；从乌拉尔甘草中发现的酪氨酸酶抑制剂有甘草 ［１５］ ［１６］ 素、甘草苷、异甘草苷、异甘草素葡萄糖洋芫荽糖苷 、西北甘草异黄酮和粗毛甘草素Ｃ （其活性为 光甘草定的２倍）；从胀果甘草中发现的酪氨酸酶抑制剂除