高效疏水作用色谱分离生物活性蛋白.pdfVIP

[3]宗巍、贾锡平、郑介恒，色谱，4(1,2),105(1986). Phosphate (P204)/2-ethylhexyl(2-ethylhexyl) [4]郁嘉妹等，华东师范大学学报 （自然科学版）， phosphonicacid(P507)/tetrahydrofuran(THF)/ (3),68(1984). nitricacid/isopropyletherasthemobilephase, [5]T.Sreoko,T.Milica,Anal.Chem.,46(8),988 silicagelH—carboxylmethylcellulose—ammonium (1974). nitrateasthesationaryphase,lanthanidecanbe 收（稿日期：1986年5月22日） completelyseparated.Astheratioofthemobile SeparationofLanthanidewithThin-LayerChroma- phaseisP204/P507/THF/HNO3/isopropylether tography-Studyon P204—P507 System Cheng [3:2:90:19:280(V/V)],Sm,Eu,Gd,Tb,Dy,Ho,Er, Guifang,HuZhaoshengandJiaXiping,East Tm,YbandLucanbecompletelyseparated,and ChinaNormal University Sanghai;Zheng theratioofdeveloperisP204/P507/THF/HNO3 Jieheng,Shanghai1st.ChemicalReagentPlant /isopropylether[17:2:110:18:200(V/V)],La,Ce, The thin-layer chromatographyisa good Pr,andNdcanbecompletelyseparated.Forthe methodforseparationoftherareearthelements. detection,theplatehastobesprayedwith0.02％ UsingthedifferentratioofDi-(2-ethylhexyl) ethanolchloraphosphorLazo-m-NO2solution. 高效疏水作用色谱分离生物活性蛋白 姚志建 郭燕捷 军（事医学科学院基础医学研究所，北京） 疏水作用色谱H（ydrophobicInterac- 研究所张仁斌教授的赠品。柱长100mm，内 tionChromatography,HIC）是Hjerten[1] 径5mm。 首先命名的一类色谱，它以盐溶液为流动 高效液相色谱为Waters系统。由721程 相，弱疏水性质的材料为固定相，主要的分 序控制器，730数据处理机，441紫外检测 离对象是蛋白质。但是，Hjerten所记叙的 器，U6K进样器和两台510高压输液泵组 疏水色谱是一种以琼脂糖为支持物的软胶。 成。检测波长为280nm，流速1.0ml/min。 近年来，随着高效液相色谱技术在生物学和 血清蛋白定量采用280/205nm双波长 医学中的应用日益发展，寻找多种性能的分 法[6]。 离生物活性分子的高效色谱技术的研究十分 过氧化氢酶活力的测定[7]：取0.16m1 活跃，这其中的一个重要的方面就是高效疏 30％的过氧化氢，以M/15、pH7.0的磷酸缓 水作用色谱(HP-HIC)[2]。 冲液稀释到100ml，此溶液在240nm处的光 Kato等将丁基或酚基缩水甘油醚与 吸收值约为0.5。取上述底物溶液3m1至石英 TSKG3000SW 柱偶联[3]，Fausnaugh等 比色杯中，25℃