HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素含量.doc

HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素含量[摘要] 目的：用HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量。方法：采用ODS-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.4%磷酸（55?45）；流速1.0 ml/min；检测波长360nm。结果：异鼠李素浓度在2.82~28.20 μg/ml范围内线性良好，r=0.999 8（n=8），平均回收率为100.18%，RSD为1.73%(n=9)。结论：本法可用于控制垂盆草中有效成分的含量，简便、准确、灵敏度高。 [关键词] 垂盆草；提取物；含量测定；HPLC [中图分类号]R917[文献标识码]B[文章编号] 1673-7210（2007）12（c）-160-02 Content determination of isorhamnetin in the extract of Sedum sarmentosum Bunge by HPLC MA Jia-lei, LI Qun-li*, XU Ling-ling (Medical College of Jinhua Profession and Technology College, Jinhua321007, China) [Abstract] Objective: To develop a method for the content determination of isorhamnetin in Sedum sarmentosum Bunge. Methods: The samples were analyzed on an ODS-C18 column with mobile phase of methanol-0.4% phosphoric acid (55?45) at flow rate 1.0 ml/min and detective wavelength of 360 nm. Results: The standard curves were linear relationship at the range of 2.82~28.20 μg/ml(r=0.999 8).The average recovery was 100.18% (RSD=1.73%). Conclusion: The method can be used to determine the content of isorhamnetin in Sedum sarmentosum Bunge.The method is simple,accurate and suitable for the quality evaluation of Sedum sarmentosum Bunge extract. [Key words] Sedum sarmentosum Bunge；Extract；Content determination；HPLC 垂盆草系景天科植物垂盆草的新鲜或干燥的全草，味甘、淡、性凉，具有清热解毒、利尿消肿、排脓生肌之效。化学研究表明，垂盆草主要含有糖类、黄酮类[1]、氰苷类成分等[2,3]。药理学研究表明，垂盆草具有抑制炎性渗出，减少肝细胞损伤的作用，能显著降低肝炎患者血清谷丙转氨酶[4~6]，临床广泛用于急性肝炎、迁移性肝炎及慢性肝炎活动期的治疗。目前临床应用的垂盆草制剂（如冲剂、颗粒剂、片剂等）中有效成分含量差别很大[7]。本文经过对其有效成分进行HPLC法含量控制，提高其提取率，从而促进垂盆草制剂的临床应用。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Waters 2487高效液相色谱仪，附有2487紫外分光检测器，Breeze色谱工作站，20 μl自动进样阀。 1.2 试剂 磷酸（无锡阳山生化有限责任公司），甲醇（上海诚心化工有限公司），均为GR。 1.3 对照品 异鼠李素对照品（中国药品生物制品检定所，批号110860-200407）。 1.4 样品 垂盆草提取物（自制；批20060702 2 方法与结果 2.1 色谱条件 Diamonsil C18（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱；流动相为甲醇-0.4%磷酸（55?45）；流速1.0 ml/min；检测波长360 nm；灵敏度0.1Aufs；进样体积20 μl；理论塔板数以异鼠李素峰计不低于5 382。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取异鼠李素对照品约14.1 mg，置于250 ml的量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度，摇匀，备用，作为储备液。精密吸取储备液6 ml，置于25