二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞株survivin表达影响.doc

二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞株survivin表达影响【摘要】目的：观察二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）作用于人白血病HL-60细胞株后，细胞增殖及survivin蛋白表达的变化，探讨DADS对HL-60细胞增殖的影响及其机制。 方法：DADS作用HL-60后，MTT法检测细胞增殖情况，SP-免疫组化法检测细胞survivin蛋白表达的变化。 结果：DADS可以呈时间－浓度依赖性抑制HL-60细胞增殖并下调survivin蛋白的表达。 结论：DADS能通过下调survivin蛋白的表达而抑制HL-60细胞的增殖。 【关键词】二烯丙基二硫；HL-60细胞株；Survivin 文章编号：1009-5519（2007）21-3166-02 中图分类号：R73 文献标识码：A Effect of diallyl disulfide on the expression of survivin protein in human leukemia HL-60 cell line YU Ming-xia，FAN Zi-li，YAO Chen-jiao (Department of Hematology，The Third Affiliated Hospital of Xiangya Medical College，Central South University，Changsha 410013，China) 【Abstract】Objective：To study the proliferation and expression ofsurvivin protein in human leukemia HL-60 cell line treated with diallyl disulfide (DADS) and to thus investigate the mechanism of DADS to inhibit HL-60 cells’ growth.Methods：MTT was used to test the growth of HL-60 cells treated by DADS；while SP-immunohistochemistry for the expression of survivin protein in HL-60 cells.Results：DADS could inhibit the proliferation and down-regulate the expression of survivin protein of HL-60 cell line in a dose-time dependent manner.Conclusion：DADS can effectively inhibit the proliferation of HL-60 cell line by down-regulating the level of survivin protein. 【Key words】Diallyl disulfide；HL-60 cell line；Survivin 二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）是一种小分子量的大蒜脂溶性提取物，有研究表明，DADS可以抑制白血病、乳腺癌、皮肤癌、肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、结肠癌等肿瘤细胞的生长[1]。本试验选用人急性髓系白血病HL-60细胞株为研究对象，观察DADS作用后细胞增殖及survivin蛋白表达的变化，以探讨DADS对HL-60细胞增殖的影响及其机制。 1 材料与方法 1.1 试剂：1640培养基为美国GIBCO 公司产品，小牛血清为杭州四季青生物工程公司产品。四甲基偶氮唑盐（MTT）为北京夏新生物有限公司产品，SP－免疫组化染色试剂盒为北京中衫金桥生物技术有限公司，兔抗人survivin IgG多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司，DADS为美国Fluka 公司产品，按说明书用二甲基亚枫（DMSO）溶解配制，DMSO终浓度0.01％。 1.2 细胞系：人急性髓系白血病HL-60细胞株由中南大学湘雅医学院细胞中心提供。细胞生长于含10％的灭活新生小牛血清的RPMI1640完全培养基中，置于37 ℃、5%二氧化碳（CO2）饱和湿度的培养箱中培养。细胞经传代和收集，取对数生长期细胞进行实验。 1.3 MTT比色实验测定细胞增殖：实验分为8组。1～6 组为不同浓度(0.625、1.25、2.5、5.0、10.0、20.0 mg/L)DADS；7组为空白对照(RPMI 1640)；8组为溶媒DMSO对照组(终浓度为0.01