急(慢)性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平及肝功能关系.docVIP

急(慢)性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平及肝功能关系【摘要】目的：研究急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎PBMC培养上清液中IL-12水平与血清ALT及TBIL之间的关系。方法：应用Ficoll Hypaque密度梯度离心法从肝素化血中分离外周血PBMC，用ELISA方法检测PBMC培养上清液IL-12和血清ALT及TBIL水平。结果：急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎PBMC培养上清液中IL-12水平与血清ALT及TBIL水平呈正相关。结论：急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎PBMC培养上清液中IL-12水平与肝功炎症活动密切相关。 【关键词】乙型肝炎；肝功；PBMC；IL-12 文章编号：1009-5519（2007）24-3678-02 中图分类号：R5 文献标识码：A IL-12是一种异源二聚体细胞因子，主要由单核吞噬细胞产生， IL-12对非特异免疫和特异性免疫都发挥重要作用，IL-12架起非特异性免疫和特异性免疫之间的桥梁，是一种前炎症细胞因子。IL-12能强有力地诱导T细胞和自然杀伤细胞产生细胞因子，尤其是IFN-?酌；也是未激活的T和NK细胞的生长因子;而且能增强CD8+T淋巴细胞及NK细胞的细胞毒性；最重要的是，IL-12能专一地促进Th1细胞生成以及对细胞毒性淋巴细胞(CTL)分化起作用。Th1型细胞因子主要参与细胞免疫，并在抗细胞内细菌及病毒感染中起关键作用，其中包括HBV。Th2细胞因子主要调节体液免疫反应，对于抗细胞外抗原有益，与变态反应或寄生虫感染有关，与细胞内病原体引起的疾病进展有关[1]。 1 资料和方法 1.1 标本来源：选取急性乙型肝炎10例、慢性乙型肝炎10例作为研究对象，均来自于2001年5月～2002年11月中国医大二院感染科就诊者，年龄18～50岁，其中男9例，女11例。诊断均符合2000年全国病毒性肝炎会议制定诊断标准，并除外其他肝炎病毒重叠感染。 1.2 PBMC分离、培养[2]：每例抽取7 ml外周静脉血，2 ml分离血清，置-20℃冰箱中保存待检。5 ml血肝素抗凝之后分离PBMC，PBMC用Ficoll Hypaque密度梯度化离心法从肝素血中分离。收集细胞并用PBS洗两次。然后将细胞加入24孔培养板中，浓度为1×106细胞/孔，加入HBcAg(0.5μg/ml)，然后加入RPMI至1 ml，在5%二氧化碳湿润条件下培养72小时，之后取其上清液放-20℃冰箱中待检。 1.3 检测：用ELISA方法检测PBMC培养上清液IL-12水平，血清ALT、TBIL。 2 结果 2.1 急性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平与血清ALT、TBIL水平相关性，经Pearson直线相关分析表明R值分别为0.946及0.793，P值分别0.01及0.05，提示急性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平与其血清ALT、TBIL水平均呈显著正相关。 2.2 慢性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平与其血清ALT、TBIL水平相关性，经Pearson直线相关分析表明R值分别为0.952及0.634，P值分别0.01及0.05，提示慢性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平与其血清ALT、TBIL水平均呈显著正相关。 3 讨论 血清ALT及TBIL是反映肝脏炎症程度的生化指标，PBMC培养上清液IL-12代表人体免疫系统生成IL-12的能力，IL-12是反映细胞免疫功能的指标。在急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎患者中，IL-12能专一地促进Th1细胞生成并对CTL分化起作用，且能增强CTL细胞毒性。CTL细胞在清除乙肝病毒同时也会造成肝细胞的损伤，表现为血清ALT及TBIL升高。 实验结果表明，随着PBMC培养上清液IL-12水平升高，血清ALT及TBIL也升高，两者呈显著正相关。PBMC培养上清液IL-12水平可以作为乙型肝炎肝脏炎症严重程度的一个指标，也就是说乙型肝炎肝脏炎症随着PBMC培养上清液IL-12水平升高而加重。 参考文献： [1] Miriam T Brady. Fasciola hepatica suppresses a protective Th1 re-sponse against bordetella pertussis[J]. Infection and Immunity，1999， 67：5372.[2] Trog F Schlaack.The presenceofhighammounts of HBVDNA in serum associated with suppressed costinulatory effects of IL-12 on HBV induced immune