血清脂联素在非酒精性脂肪性肝病发病中意义.docVIP

血清脂联素在非酒精性脂肪性肝病发病中意义【摘要】目的：探讨血清脂联素在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病中的意义。方法：雄性SD大鼠30只，分为2组，每组15只，实验组采用高脂饮食制备大鼠NAFLD模型，并检测两组血清脂联素水平及相关指标，然后进行统计学分析。结果：实验组肝细胞脂肪变性及炎性程度明显高于对照组；对照组及实验组血清脂联素、甘油三酯、血糖及胰岛素抵抗（IR）差异有显著性；直线分析肝细胞脂肪变性与血清脂联素存在有显著相关性，且与血糖、甘油三酯、IR存在正相关。结论：高脂饮食方法可成功制备出NAFLD大鼠模型，血清脂联素水平下降是NAFLD发病的主要因素，其原因与糖、脂肪代谢障碍，IR程度提高有关。 【关键词】非酒精性脂肪性肝病；脂联素；胰岛素抵抗 文章编号：1009-5519（2007）21-3162-03 中图分类号：R5 文献标识码：A 根据报道，1/3~1/2的非酒精性脂肪性肝病患者会发展为非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis，NASH），而50％的非酒精性脂肪性肝炎患者会出现肝纤维化，15％的人会出现肝硬化，3％的人最终发展为肝衰竭而需要肝移植[1]。因此，关于非酒精性脂肪性肝病的研究，特别是发病机制的研究，成为亟待解决的问题。既往研究表明脂联素具有增加胰岛素敏感性、抗炎、增加葡萄糖摄取、促进脂肪酸氧化等作用，其与脂肪肝发病可能相关。 1 材料与方法 1.1 材料：清洁级雄性SD大鼠30只，体重（150±10）g，由中科院上海实验动物中心提供，胆固醇购自武汉亚法生物技术有限公司，猪油为市售，脂联素ELISA试剂盒购自美国Chemicon公司产品，AU2700全自动生化仪（日本Olympus公司），光学显微镜（日本Olympus公司），LeiCA RM 214型切片机（德国莱卡公司），TP102型全自动封闭式组织脱水机（英国SHANDON公司）， BMJ-Ⅲ型包埋机（英国SHANDON公司），CS-VI型摊片烤片机（孝感市宏业医用仪器有限公司），高速台式离心机（科大创新股份有限公司）。 1.2 实验方法：30只大鼠在动物房内适应性饲养1周后，随机分为两组，实验组和对照组各15只。对照组采用标准饲料，实验组采用高脂饲料：88%标准饲料+10%猪油+2%胆固醇喂养[2]。所有实验动物均自由饮水进食。两组大鼠均于造模12周后处死。各组大鼠处死前，禁食10小时以上，称体重后，以氯胺酮按150mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，腹主动脉采血，血液置于干燥玻璃管内，迅速送本院生化实验室，测量所需数据。用日本Olympus AU2700全自动生化分析仪检测空腹血糖（FBG）、血清甘油三酯（TG），严格按说明书进行操作。采用化学发光法测定空腹血清胰岛素（FINS）水平，按HOMA模型计算空腹状态下胰岛素抵抗指数（IRI）＝（FINS×FBG）/22.5。酶联免疫吸附法测定血清脂联素水平。取肝脏并迅速称肝脏湿重，计算肝指数（肝湿重/动物空腹体重），同时观察肝脏的颜色、质地，并从肝右叶中部切取小块肝组织，10%甲醛固定后制备石蜡切片，并做病理学观察，其中脂肪变性程度以2006年2期中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组颁布的《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》为标准，肝脏炎性程度以2002年2期的《指南》为标准。 1.3 统计学处理：采用SPSS13.0进行统计学处理，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，经检验本组数据除HOMA-IR外基本服从正态分布，且方差齐，HOMA-IR数据呈偏态分布，经自然对数(1n)转换后近似正态分布，故该指标均采用对数形式参与分析。两样本均数比较采用t检验，P0.05，则认为两组数据差异有显著性。直线相关及多元线性回归用于相关分析。 2 结果 2.1 大鼠生活情况：实验过程中未发生大鼠死亡，30只实验大鼠均进入结果分析。实验组较正常对照组体重增长较快，但两组间体重变化差异无显著性（见表1）。 2.2 大体标本观察：正常对照组肝组织表面光滑、红润、肝边缘锐利（见图1）。造模组大鼠肝脏体积增大，外形饱满圆钝，色泽浅黄或土黄色（见图2）。 2.3 肝组织病理变化：光镜下正常对照组HE染色可见肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列，未见到有肝细胞脂肪变形（见图3）。实验组大鼠肝细胞均出现大泡性脂肪变，多数肝细胞肿胀、气球样变，肝窦间隙明显变窄，汇管区可见炎性细胞浸润（见图4）。肝组织病理评分：见表2。 3 讨论 脂联素是由脂肪细胞分泌的细胞因子，由244个氨基酸组成，氨基末端18个氨基酸为分泌信号肽，19-41氨基酸为一非螺旋序列，42-107氨基酸为一段22个胶原重复序列。羧基端108-244