酶联免疫吸咐试验(ELISA)常见问题原因研究及处理.docVIP

酶联免疫吸咐试验(ELISA)常见问题原因研究及处理[关键词] 酶联免疫吸咐试验；问题；原因；分析 [中图分类号]R-331 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）05（c）-118-03 酶联免疫吸咐试验（ELISA）具有灵敏度高、特异性好的特点，广泛应用于各种传染性疾病的筛查，如肝炎、HIV，也可应用优生优育等。优质的试剂、良好的仪器和正确的操作是保证ELISA实验结果准确、可靠的必要条件。试验中若不做好相关控制，易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象（空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的OD值却明显偏高）是各级临床实验室常遇到的问题。现将ELISA实验操作中的影响因素总结如下： 1标本因素 以辣根过氧化物酶（HRP）为标记的ELISA测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性；混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；标本凝固不全，在临床试验中，有时为了争取时间而快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染；塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本