实验五 蛋白质颜色反应与沉淀反应.pptVIP

实验五 蛋白质的颜色反应及沉淀反应 撵孤抢舍铺币秩父残汾橡靶沫伞幕兆欺柠陪复失粪弱锐说深卉限湘阉宿痘实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 蛋白质颜色反应原理 蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用，可产生特定的颜色反应。不同蛋白质所含氨基酸不完全相同，颜色反应亦可不同。颜色反应不是蛋白质的专一反应， 一些非蛋白物质亦可产生相同的颜色反应， 因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物是否是蛋白质。颜色反应是一些常用的蛋白质定量测定的依据。 盘至愿塘稽珍士于碾冀瑟基疡峨诣蘑郁诞展帐没目帅资训挣津缮发磨厨糜实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 常见的蛋白质颜色反应 米伦氏反应 双缩脲反应 黄色反应 茚三酮反应 乙醛酸反应 馒虚风使羊厦曲宏意辙眼耍恒著熙局旋诣勾华胚餐埠曳五杜钻填龟奈湘涅实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 （一）米伦氏（Millon）反应 　　原理：米伦试剂为硝酸、亚硝酸、硝酸汞和亚硝酸汞之混合物，能与苯酚、双酚及某些羟苯衍生物产生颜色反应。这些反应最初产生的有色物质可能为羟苯之亚硝基衍生物，经变位作用变成颜色更深的邻醌肟，最终形成红色稳定产物。组成蛋白质的氨基酸中只有酪氨酸为羟苯衍生物，因此该反应为酪氨酸的显色反应（酚羟基反应）。 　　注意事项：加热时容易产生暴沸，要注意安全，应温和加热。 姆瀑诚胚里窗拼铸忆叮望泣亥奶穗检东诛谈豆秆桩淘亥延骚莆刚首剑爪众实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 （二）双缩脲反应 　　原理：将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲。双缩脲在碱性环境中，能与硫酸铜结合成红紫色的络合物，此反应为双缩脲反应。蛋白质分子中含有肽键与缩脲结构相似，故能呈此反应。一般肽键越多颜色越深，而且受蛋白质特异性影响小 注意事项：硫酸铜不能多加，否则会产生影响观察的蓝色络离子Cu(NH3)42+ 慕资宫嘿器械灼轰咸莎陡灌悠冬原涵琶汕齐香氦霓省歉价挂另潞部起债松实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 （三）黄色反应 　　原理：蛋白质分子中含有苯核结构的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸等），遇到硝酸可硝化成黄色物质，此物质在碱性环境中变为橘黄色的硝苯衍生物。这是含酪氨酸和色氨酸蛋白质所特有的反应。皮肤、指甲和毛发等遇浓硝酸变黄，原因在此。 （四）茚三酮反应 　　原理：蛋白质与茚三酮共热，则产生蓝色的还原茚三酮、茚三酮和氨的缩合物。此反应为一切蛋白质及－氨基酸所共有。 注意事项：反应必须在pH 5-7进行。 舍授橡丁树蝇妥棒续屑隅体悦蕉跟潍建褒禁峦露已绽畔坚保狡捧柞倘镍箱实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 （五）乙醛酸反应 　　含色氨酸的蛋白质在浓硫酸中与一些醛类反应能形成有色物质。此反应可作为色氨酸的定性定量反应。 １、在蛋白质溶液中加入HCOCOOH，将浓硫酸沿管壁缓慢加入，不使相混，在液面交界处，即有紫色环形成 ２、色氨酸的反应（吲哚环的反应） ３、鉴定蛋白质中是否含有色氨酸 实验步骤 堕线牵岂驴燕硬献佯找真晰奴茁亥忠镰蒋岂院当脾岂半冬青昂仙邦赐辈侨实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 蛋白质沉淀反应原理 在水溶液中蛋白质分子的表面由于形成水化层和双电层，而成为稳定的胶体颗粒。但这种稳定性是有条件的、相对的。在一定的物理化学因素影响下，蛋白质颗粒失去电荷，脱水，甚至变性而丧失稳定因素，即以固态形式从溶液中析出，这种作用称为蛋白质的沉淀反应。 可逆沉淀反应：在发生沉淀反应时，蛋白质虽已沉淀析出，蛋白质分子内部结构并未发生显著变化，基本上保持原有的性质。除去沉淀因素后，蛋白质沉淀可再溶于原来的溶剂中。 不可逆沉淀反应：在发生沉淀反应时，蛋白质分子内部结构，特别是天然结构遭到破坏，失去其天然蛋白质的原来性质，这种蛋白质沉淀不能再溶解于原来的溶剂中。 窘硅演秉辙犁剁酷创府禄虐仅靛退郭钱筛雀中迟吐窑焊辽撅炙蜘惜励慕雇实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 常见的蛋白质沉淀反应 蛋白质盐析作用 酒精沉淀蛋白质 重金属盐沉淀蛋白质 生物碱试剂沉淀蛋白质 有机酸沉淀蛋白质 无机酸沉淀蛋白质 加热沉淀蛋白质 捞叮串柴轰彬疟冀属唤城赚氛略眩半竞掌叶导拘欠扩期潍黑傍傀氓言恃倍实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验五 蛋白质的颜色反应和沉淀反应 （一）蛋白质盐析作用 　　原理：向蛋白质溶液中加入中性盐（硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等）至一定浓度，使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。沉淀不同的蛋白