3O例严重少精症,无精子症患者的遗传学分析.pdf

1736 CHINATROPICALMEDICINEVo1．6No．9September2006 中国热带医学2006年第 6卷第 9期 [生殖与健康] 3O例严重少精症、无精子症患者的遗传学分析 Geneticanalysisof30severespermacrasiaandazoospermiapatients．CHENXue—yin，LIQi，MAYah— lin，eta1．(AffiliatedHospitalofHainanMedicalCollege，Haikou570102，Hainan，P．R．China) 陈雪银，李崎，马燕琳 ，金应霞，麦扬青，黎明红 摘要 ：目的 探讨严重少精症和无精子症与遗传 因素的关系。 方法 260例染色体 G带分析 ；l16例 Y染色体 AZF区 18个微缺失住点进行 多重 PCR基 因扩增检测分析。 结果 30例严重少精症和无精子症患者发现遗传异 常，其 中26例染色体异常，4例 AZF基 因有微缺失。 结论 严重少精症和无精子症与遗传密切相关，但严重少精症 和无精子症的染色体分析与 Y染色体 AZF微缺失住点检测无相关性 。 关键词 ：严重少精症 ；无精子症 ；无精子因子；Y染色体微缺失；染色体核型分析 中图分类号：R698．2 文献标识码 ：B 文章编号：1009—9727(2006)09—1736—02 近年来研究表明，男性原发无精症 (Idiopathicazoospermla， 表 1 染色体异常者的核型 IA)和少精症(Idiopathicoligospermia，IO)与遗传因素 ，包括染色 体数 目、结构异常外，部分与Y染色体微缺失 (Azoospermiafactor AzF)密切相关 。现将海南医学院附属医院妇产科生殖 医学 中 心门诊 30例原发不孕患者 ，精液连续检查确诊无精症和少精 症的遗传病因结果分析报告如下。 1 材料与方法 1．1 材料来源 30例均来 自海南医学院附属医院妇产科生殖 医学 中心 门诊 ，婚后原发不孕就诊病人。年龄 20～45岁，平均 年龄 32．9岁。其 中无精症9例 ，严重少精症 21例。按 WHO精 液常规分析标准确定为无精或严重少精 。精液检查至少分析 2次以上(包括离心沉淀厚片分析)。 1．2 检测方法 1．2．1 细胞遗传学检查 常规外周血淋巴细胞培养，染色体 G带分析 ，镜下计数 30—100个 中期分裂相 ，分析 3个 以上核 型 。 表2 Y染色体AZF微缺失位点患者 1．2．2 分子遗传学检查 外周血常规酚 ／氯仿提取 DNA，检测 DNA浓度和纯度。引物 由上海生工生物技术公司合成。经多 重 PCR技术对Y染色体微缺失AZFa区sY84、sY86、sY182；AZFb 区 sY121、sY124、sY127、sY128、sY130、sY134；AZFd 区 sY145、 sY152、sY153；AZFe区 sY239、sY242、sY254、sY255、sY157共 18个 微缺失位点进行扩增 。采用 100bp的分子量标准 ，产物经聚丙 烯酰氨凝胶垂直 电泳或琼脂糖 电泳后 ，用 Alphalmager2200凝 胶成像系统观察分析条带。 2 结果 3 讨论 2．1 染色体核型分析 260例严重少精或无精子症患者检出 遗传性因素是引起男性不育的主要因素，其中染色体异常 染色体异常26例 ，占10％(26／260)。见表 1。 与无精症和严重少精症 的发生密切相关 。精子 的发生受诸多 2．2 AZF基 因检测 116例严重少精或无精症者 ，基 因微缺失 有序表达的基因控制