肿瘤酸度响应性聚L鄄赖氨酸鄄阿霉素键合药的制备与表征.PDF

Vol.33 高等 学校 化 学 学报 No.12 2012年12月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 2809~2815 肿瘤酸度响应性聚(L鄄赖氨酸)鄄阿霉素 键合药的制备与表征 1,2 2,3 2 2 2 1 2 张建成 ,丁建勋 , 肖春生 ,贺超良 ,庄秀丽 ,杨亚楠 ,陈学思 (1. 长春工业大学化学工程学院,长春 130012;2. 中国科学院长春应用化学研究所, 生态环境高分子材料重点实验室,长春 130022;3. 中国科学院研究生院,北京 100049) 摘要摇 用丁二酸酐(SA)和顺式乌头酸酐(CA)分别对阿霉素(DOX)进行修饰,得到非酸响应的SA鄄DOX (SAD)和酸响应的CA鄄DOX(CAD). 通过 SAD 或 CAD、 端羧基化的聚乙二醇单甲醚(mPEG鄄COOH)与聚 (L鄄赖氨酸)(PLL)的缩合反应,制得非酸响应的PLL鄄g鄄mPEG/ SAD和酸响应的PLL鄄g鄄mPEG/ CAD键合药. 通 过核磁共振氢谱和红外光谱表征键合药的化学结构,并通过紫外鄄可见分光光度计测定药物键合量. 动态激 光光散射研究结果表明,两亲性的PLL鄄DOX键合药可以在pH=7郾4 的磷酸缓冲溶液中自组装形成稳定的纳 米微粒. 体外释放实验及噻唑蓝检测结果表明,PLL鄄g鄄mPEG/ SAD在实验pH范围和时间段内只释放出少量 DOX,不具有酸响应特性,且对HeLa细胞增殖抑制作用较小. 而PLL鄄g鄄mPEG/ CAD在生理条件(pH=7郾4) 下相对稳定,在弱酸性条件(pH=5郾3,6郾8)下,CAD 中酸响应的酰胺键能快速水解并释放出DOX,表现出 较强的HeLa细胞增殖抑制效果. 关键词摇 阿霉素;聚(L鄄赖氨酸);肿瘤酸度响应性;肿瘤细胞增殖抑制 中图分类号摇 O632;O629郾7摇 摇 摇 摇 文献标识码摇 A摇 摇 摇 摇 doi:10.7503/ cjc [1~4] 近年来,恶性肿瘤已经成为人类健康的最大杀手之一,因此对于抗肿瘤药物的研究备受关注 . 蒽环类抗肿瘤药是从20世纪70年代开始发展起来的, 目前广泛使用的广谱抗肿瘤药主要包括阿霉素 (DOX)、正定霉素(DAU)、依柔比星(EPI)和吡柔比星(PIR)4种. 其中,DOX 的研究最为广泛,并在 临床上应用于治疗各种实体瘤、淋巴瘤及白血病等. 但DOX在体内对正常组织和器官的毒性是限制其 应用的重要瓶颈. 为了减轻或消除DOX 的毒副作用,提高其生物利用度和药效,以其为传输对象的高 分子载药体系被广泛研究[5~9]. DOX主要通过化学键合或物理负载的方法与适当的高分子载体结合, 使其更好地发挥作用. 目前,脂肪族聚酯、聚磷酸酯和聚氨基酸等多种生物相容性和生物降解性较好 的高分子被用作DOX 的传输载体材料[5,10,11]. 另外,作为静脉注射用的DOX传输体系,还需要在体系 中引入聚乙二醇和聚两性离子等组分,以提高载体材料的亲水性,降低高分子载药体系在血液循环过 程中的非特异性蛋白吸附并延长药物在体内的循环时间[12~15]. 本文设计通过丁二酸酐(SA)和顺式乌头酸酐(CA)分别对 DOX进行修饰,得到非酸响应的SA鄄 DOX(SAD)和酸响应的CA鄄DOX(CAD)[16~18]. 通过DOX衍生物和端羧基化的聚乙二醇单甲醚(mPEG鄄 COOH)与聚(L鄄赖氨酸)(PLL)的缩合反应,得到非酸响应的PLL鄄g鄄mPEG/ SAD 和酸响应的PLL鄄g鄄 mPEG/ CAD键合药,并对上述键合药的体外释放和肿瘤细胞增殖抑制行为进行了研究. 1摇 实验部分 1.1摇 试剂与仪器 N(着)鄄苯甲氧羰基鄄L鄄赖氨酸(ZLL,纯度99%)、 1鄄乙基鄄(3鄄二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐 收稿日期:2012鄄02鄄16. 基金项目:国家自然