衣原体立克次体.PPT

第十八章支原体、 衣原体、立克次体 第一节支原体 是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。由于它们能形成有分支的长丝，故称之为支原体。 支原体科分支原体属和脲原体属两个属。对人致病的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖器支原体、穿通支原体和溶脲脲原体。除此之外，支原体还经常污染细胞培养，给实验室病毒分离、单克隆抗体制备等工作带来一定困难。 一、肺炎支原体 感染呈全球性分布，主要侵犯呼吸系统,借滑行运动穿过粘膜上皮细胞纤毛屏障，主要粘附因子为一类对胰酶敏感的表面蛋白，称Pl蛋白。 是青少年急性呼吸道感染的主要病原体，表现为上呼吸道感染综合征，占非细菌性肺炎的1／3以上。过去认为是温和的病原体，现在认为它也可引起严重的双侧肺炎和其他系统的肺外并发症，如心肌炎、心包炎、免疫性溶血性贫血、肾炎等。 微生物特性 1．形态与结构 类似酒瓶状，没有细胞壁，仅有细胞膜。G-易着色，Giemsa染色呈淡紫色。细胞膜中胆固醇含量多。所有肺炎2株共同具有P1蛋白，是主要特异性免疫原和血清学诊断的主要抗原。 2.抗原结构 来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原， 常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。GIT是将吸有型特异性抗血清 的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上， 经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现 象。MIT是将支原体接种在含有抗血清培养 基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支 原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将 支原体分成若干血清型。 3．培养特性 以二分裂繁殖，繁殖较慢；生 长需要胆固醇；反复传代后呈“荷包蛋” 状菌落，可迅速溶解哺乳动物红细胞。 4．生化反应 肺炎支原体可根据是否能利用 葡萄糖、水解精氨酸和尿素来与其他支原 体进行鉴别。 5.抵抗力 1.对热的抵抗力一般与细菌相似。耐冷， -70℃或液氮可长期冻存, 4℃放置也不 要超过3天。 2.支原体对干燥敏感，干燥的标本难以分离出支原体。没有细胞壁青霉素不敏感。 检验程序 1 .标本采集 肺炎支原体有粘附细胞作用，以 咽拭子标本为好，取材后宜立即接种。 2. PCR法快速、敏感和特异，目前某些临床实 验室以特异性引物通过这一技术从患者痰中 检测肺炎支原体DNA。 3. 电子显微镜观察无细胞壁，易与细菌鉴别。 4.分离培养 以牛心消化液为基础,加20％小牛血清及新鲜酵母浸液制成的液体或固体培养基。加入青霉素,可防止杂菌生长。初次分离生长缓慢，在含5％C02下培养，10天长出油煎蛋状菌落。能发酵葡萄糖产酸，不能利用精氨酸与尿素，可还原美蓝。分离培养阳性率不高，对临床诊断意义不大, 但对流行病学调查有重要意义 。 5．抗体检测 (1)ELISA：此法敏感，特异性高，快速、经济，并可检测IgM和IgG抗体，为目前诊断的可靠方法。检测分子量190kDa的P1蛋白，3h可完成试验，特异性高，敏感性为10 4CFU／μl标本。 (2)补体结合(CF)试验 试验所用的抗原为氯仿·甲醇提取的糖脂类抗原。 双份血清试验，效价呈4倍增长者，或单份血清效价≥l：128者，80％的病例表明近期有肺炎支原体感染。 (3)间接血凝试验 操作简便，敏感度略高于补体结合试验，感染发病后7天出阳性，10-30天达高峰，12-26周逐渐降低。 本试验与补体结合试验类似，主要测lgM 抗体，与生殖道支原体之间存在交叉反 应。 (4)冷凝集试验 是一种非特异性试验。其方法是将患者血清与O型Rh阴性红细胞在4 ℃下作凝集试验。有33％—76％肺炎支原体感染者为阳性 (效价≥1：64)。效价越高或双份血清呈4倍以上升高，肺炎支原体近期感染的可能性越大。 二、解脲脲原体 也称溶脲脲原体，是1954年Shepard首先从非淋菌性尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得，因其分解尿素的特性命名为解脲脲原体。在分类学上属人支原体科脲原体属。是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌之一，近年来研究发现，它与多种疾病有关，故引起国内外有关学者的广泛重视。 1.寄居泌尿生殖道，传播途径为性接触和母婴传播。致病机制与侵袭性酶有关。吸附后产生磷脂酶分解胞膜中的磷脂，脲酶分解尿素产氨，影响宿主细胞生物合成。产生IgA蛋白酶，破坏IgA的局部抗感染作用，有利于粘附和致病。 2.引起非淋菌性尿道炎(NGU) ，上行感染，可引起前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈炎，并可导致流产。因为与人精子膜有共同抗原，对精子可造成免疫损伤而致不育。 微生物