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QuantStudio qPCR系统可以精准区分15倍模板差异 - Thermo Fisher
QuantStudio qPCR系统
可以精准区分1.5倍模板差异
精确区分1.5倍模板差异
实时荧光定量PCR是一种实时监控核酸扩增的技术,可针对核酸和蛋白进行灵敏且特异性的检测和定量。
QuantStudio™家族拥有一系列高性能的qPCR仪,提供准确、快速、灵活、功能多样的qPCR研究解决方案。
QuantStudio qPCR仪采用先进的OptiFlex™增强型荧光检测系统,可带来更高的精确度,准确区分出低至1.5
倍的目标模板量差异。
A A
B B
2 Target:18srRNA Slope:-3.274 Y-Inter:24.739 R2:0.997 Eff%:102.048 Error:0.043
Target:18srRNA Slope:-3.431 Y-Inter:25.242 R :0.999 Eff%:95.63 Error:0.023
图1. QuantStudio 3/5 可以精准区分1.5倍模板差异。 图2. QuantStudio 6/7可以精准区分1.5倍模板差异。
(A 图) 扩增曲线:使用TaqMan Gene Expression Master Mix和Euk (A 图) 扩增曲线:使用TaqMan Gene Expression Master Mix和Euk
18s rRNA probe扩增1.5倍稀释的Human Male Raj i cDNA 。模板量 18s rRNA probe扩增1.5倍稀释的Human Male Raji cDNA 。模板量和
和Ct (SD) :100.00pg ,18.364 (0.018) ;66.67pg ,18.984 (0.012) ; Ct (SD) :100.00pg ,18.134 (0.018) ;66.67pg ,18.775 (0.032) ;
44.44pg ,19.591 (0.040) ;29.63pg ,20.219 (0.014) ;19.75pg , 44.44pg ,19.394 (0.025) ;29.63pg ,19.963 (0.032) ;19.75pg ,
20.804 (0.038) ;13.17pg ,21.377 (0.032) 。扩增曲线显示可以有效 20.517 (0.044) ;13.17pg ,21.010 (0.024) 。扩增曲线显示可以有效
区分1.5倍模板差异,并且具有很好的重复性(CtSD 0.05) 。 区分1.5倍模板差异,并且具有很好的重复性(CtSD 0.05) 。
(B图) 标准曲线:显示具有很好的R2 (0.999)和扩增效率(95.6%) 。 (B图) 标准曲线:显示具有很好的R2 (0.997)和扩增效率(102.0%) 。
如上述实验结果所示:QuantStudio qPCR仪可以有效区分1.5倍模板差异,置信度99.7% (根据相邻点的拷贝
± ×
数 3 SD计算得出)。此特点使得QuantStudio qPCR仪更加适用于检测低差异样品。
实时荧光定量PCR应用
基因表达 稀有突变检测
TaqMan Assay技术是基因表达分析的金标准。我们 肿瘤样本通常含有稀少的体细胞突变。我们预先设计
已经预先设计好超过150万种覆盖23个物种的基因表 的Assay覆盖了47种主要癌症基因的821个突变位点,
达Assay 。 并且不断增加新的Assay。
ncRNA分析 CNV分析
非编码RNA (ncRNA) ,如miRNA和其它小RNA在基因 拷贝数变异(CNV)指基因组中从1kb到数百万bp范围
调控中发挥重要作用。我们提供从样品制备到ncRNA 内的缺失、插入、重复和复杂多位点的变异。针对这
定量和图谱分析的整体解决方案。
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