阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白.pdfVIP

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阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白

维普资讯 2004年 9月 色 谱 V0l_22N0.5 September2004 ChineseJournalofChromatography 543—546 阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋 白 王宾香, 时祥柱, 郭春腾, 叶秀云, 王中来, 饶平凡 (福州大学生物工程研究所 ,福建 福州 350002) 摘要:将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联 ,使苦瓜籽粗提液中未被 阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接 在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性 的蛋 白。两个抗真菌蛋 白经鉴定都达到了电泳纯 ,相对分子质量均 为30000左右 ,Ⅳ-端氨基 酸序列分别为 DVSFRLSGADPRSYGMn 与 DVNFDLSTATAK,表 明所得到的两种蛋 白为苦瓜籽 中的2个 I型核糖体失活蛋 白 一苦瓜素 (—MMC)和 口-苦瓜素 (卢-MMC)。抗菌实验表明,-MMC对香蕉枯萎菌和果腐霉菌均具有较强的抑制作用 ,口-MMC对果腐霉菌有较强 的抑制作用 ,而 —MMC和 卢一MMC对 白绢菌的抑制活性均不明显 。采用串联色谱 ,-MMC和 口-MMC的质量 回收 率分别为 l3.8%和 8.0%。 关键词 :阴离子交换色谱 ;阳离子交换色谱 ;串联色谱 ;苦瓜籽 ;纯化 ;核糖体失活蛋白 中图分类号 :0658 文献标识码 :A 文章编号:1000—8713(2004)05-0543—04 Isolation andPurification ofRibosome..Inactivating Proteinsfrom BitterM elon Seedsby Ion 、 , 一 __ , ExchangeChromatographicColumnsin Series 一

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