草鱼ATGL基因的表达及饲喂n-3HUFAs对其影响的研究.PDFVIP

第八届世界华人鱼虾营养大会（2011.09.06-10 成都） 草鱼ATGL基因的表达及饲喂n-3 HUFAs对其影响的研究 Study on ATGL gene expression and the influence of n-3 HUFAs in grass carp (Ctenopharyngodon idellus) 黄吉芹* 吉红 刘品 西北农林科技大学动物科技学院 二零一一年九月八日 / 汇报提纲 Contents 1 2 3 4 1.研究背景Backgrounds 激素敏感脂肪酶( hormone-sensitive lipase, HSL) 一 直被认为是脂肪分解主要限速酶 （Holm et al. 2003 ） HSL 基因敲除鼠饲喂高脂日粮后，脂肪组织TG水 解酶活性保留了近40% (Wang et al. 2001) ，且有大 量DG堆积(Haemmerle et al. 2002)，推测尚存在其 它TG水解酶 Zimmermann等 （2004 ）和Jenkins等 （2004 ）发现 了一种新的TG水解酶，命名为脂肪组织甘油三酯 酯酶（adipose triglyceride lipase, ATGL ） ATGL 是催化TG第一步水解的重要脂肪酶，它 能特异性地水解TG为DG 在ATGL 基因敲除鼠的心肌、骨骼肌和脂肪组织中，与 FFA摄取、氧化及TG合成相关酶的基因表达明显下降 (Pinent et al. 2008) 人、小鼠等的ATGL 已成功克隆，并研究了ATGL 的组织 表达及因子处理的影响，但在鱼类中只有大黄鱼和长 腭泥鰕虎鱼的ATGL成功克隆，而相关研究未见报道 另一方面，n-3 HUFAs对脂质代谢的调控作用日益受到 关注 然而，在鱼类的相关研究中 前人研究多侧重n-3 HUFAs对脂肪酸合成、 转运等相关基因的影响（2007, Du et al. 2008, Todorčević et al. 2008, Ji et al. , 2011 ）， 而分解方面研究的较少 关于n-3 HUFAs影响鱼类脂质水解酶的研究， 仅见马晶晶等(2010)探讨了n-3 HUFAs与HSL 的关系 问题 ATGL在草鱼各组织的表达是什么情况？ n-3 HUFAs对ATGL 的表达是否有影响？ 对上述问题的回答 - 将有助于明确淡水鱼的脂质利用机理 - 为淡水鱼n-3 HUFAs营养理论研究提供新的资料 2.研究内容Research contents 草 鱼 技 取肝胰脏、肌肉、 用含n-3 HUFAs的日粮饲喂草鱼， 术 设计引物 脂肪、心脏、鳃 分别在第1周，第2周，第3周， 组织样，-80℃保存 第4周取草鱼肝胰脏组织样 路 线 ATGL部分cDNA克隆 检测ATGL mRNA在不同组织的表达水平 检测ATGL mRNA在不同周次的表达水平 初步探讨草鱼ATGL 的时空表达特点 试验方法 1) ATGL基因的克隆 根据Genbank中登录的人、小鼠、鸡、猪、大黄鱼的 ATGL基因，设计引物 取草鱼肝胰脏 Trizol法提取 反转录成 基因扩增 组织