表达和定位分析.PDFVIP

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2015, 23(1): 41~51 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.01.005 玉米热激转录因子基因(ZmHsf06) 的克隆、表达和定位分析 李慧聪 李国良 郭秀林* 河北省农林科学院遗传生理研究所/河北省植物转 因中心重点实验室，石家庄050051 *通讯作者，myhf2002@163.com 要 热激转录因子(heat shock transcription factors, Hsfs) 在植物抵御热胁迫及其他抗逆反应过程中起 重要调控作用，之前的研究主要来自模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana) 和番茄(Lycopersicon esculentum) ，在玉米(Zea mays) 中研究尚少。本研究通过同源基因克隆的方法，从42 热胁迫1 h 的玉米 幼叶中克隆了玉米热激转录因子基因ZmHsf06(GenBank 登录号: GRMZM2G 115456_T0 1)，并对其在玉米 不同器官中的表达水平及亚细胞定位进行了分析。结果显示，ZmHsf06 编码序列全长1 584 bp ，编码527 个氨 酸,包含典型的Hsf 家族DNA 结合结构域。序列分析表明，该蛋白含有核定位信号序列KKRR ，核 输出信号序列IGDLTEQM 和序列为DSFWEQFL 的AHA(aromatic, large hydrophobicand acidic amino residues)激活结构域。正常生长条件下，ZmHsf06 在玉米幼苗的根系、茎和叶片以及开花期的功能叶、幼 穗、幼胚和花粉中均有不同程度的表达。幼苗期根中的表达量相对较高；开花期在花粉中表达最高，功能 叶中最低。42 热胁迫、外源脱落酸(abscisic acid, ABA) 和盐胁迫 理均能上调ZmHsf06 的表达。通过 在洋葱(Allium cepa L.) 内表皮瞬时表达融合蛋白发现，正常条件下ZmHsf06 定位在细胞核，37 热激后 也只在细胞核中观察到GFP 荧光。推测玉米ZmHsf06 可能在转录水平上介导玉米花粉发育，参与了对多 种逆境胁迫的调控过程，并且在细胞核内行使上述功能。本研究为全面克隆和了解玉米热激转录因子家 族基因，并进一步阐述其生物学功能提供理论依据。 关键词 玉米，ZmHsf06，热激转录因子，逆境胁迫，花粉发育 Cloning, Expression Characteristics and Subcellular Location of Heat Shock Transcription Factor Gene (ZmHsf06) in Zea mays LI Hui-Cong LI Guo-Liang GUO Xiu-Lin* Plant Genetic Engineering Center of Hebei Province, Institute of Genetics and Physiology, Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051, China * Corresponding author, myhf2002@163.com Abstract Heat shock transcription factors (Hsfs) widely exist in plants and play a key role under extreme environmental conditions, especially under heat shock stress. Most researches focused on model plants such as Arabidopsis and tomato (Lycopersicon escule