山东地区三株鸽I型副粘病毒的分离及鉴定.PDFVIP

维普资讯 一 29一 中国动物检疫 2007年第 24卷第 5期 文章编号：1005—944X(2007)05—0029—03 山东地区三株鸽 I型副粘病毒的分离及鉴定 徐天刚1，2) 池振明’)刘华雷 2) 王志亮 ) (1中国海洋大学生命科学院 山东青岛 266003， 2中国动物卫生与流行病学中心 山东青岛266032) 摘要：2005年在山东地区部分 肉鸽养殖场出现鸽子大量死亡现象，从死亡鸽中分离到三株鸽 I型副粘病 毒 (SD05027，SD05028，SD05029)，其鸡胚平均死亡时间 M(DT)分别为 69h，69．6h，81．6h；鸡脑内接种指数 (ICPI)为1．31，1．43，1．48，证明此次分离的三株病毒株均属速发型新城疫病毒。应用RT—PCR技术对 F基因重 要功能区片段扩增后进行序列测定，分析表明，F蛋白裂解位点处的序列 (112R／K—R—Q—K—R一117F)与新城疫强 毒在这一区域的序列相符。与多株已报道的NDV参考株相应片段进行序列比对和基因进化树分析，将其鉴定 为基因VIb型。 关键词：鸽 I型副粘病毒；分离鉴定；序列测定；系统发育进化树 鸽 I型副粘病毒病f俗称鸽瘟1NDV分成 了7个基 因型fI～Ⅶ1，从 2．4 病毒F基因部分序列测定 是由鸽 I型副粘病毒(PPMV一11引 而揭示了其来源和流行病学特性 根据 GenBank中收集的NDV参 起的一种高度接触性传染病．主要 我 们将此 次分 离 的三株 病毒 考株 F基因序列株序列设计引物 表现为肠炎、下痢和神经症状 ”【。禽 fSD05027，SD05028，SD05029)经 进 P1(ATGGGCTCCAGACCrlTCTAC)和 I型副粘病毒只有 1个血清型。其 行相关内容的研究证明均为仍属速 P2 CATrGGTrGCGGCAATGCTCT 宿主范围较广f包括家禽、野禽及观 发型基因WIb型的鸽 I型副粘病 C1，并进行RT—PCR扩增含裂解位 赏鸟类等1。大多数学者认为PP— 毒。 点的病毒F基因部分序列．然后进 MV一1是鸡新城疫病毒fNDV1的一 1 材料 行TA克隆 ffaKaRa公司PMD18T 种变异株 【划。因而鸽 I型副粘病毒 SPF鸡胚购 自山东农业科学院 载体1，由大连宝生物公司测定序 病也被称为鸽新城疫 家禽研究所 1日龄雏鸡 由本实验 列 。 鸽 I型副粘病最早由德国人于 室孵化。样 品为死亡鸽 3份病料。 2．5 病毒F基因的序列分析 1963年发现，1981年，苏丹、埃及大 SPF鸡血清、新城疫阳性血清、禽流 利用 DNAstar软件 和 MEGA 批鸽群暴发鸽新城疫 ．来势凶猛 ．发 感阳性血清 由本实验室提供 新城 软件包对三株鸽 I型副粘病毒株与 病率 100％，死亡率达 8O％。此后， 疫 F48E9株 由国家新城疫参考实 GenBank中已发表 的国际上公认有 本病迅速传播．现 已遍及世界许多 验室提供 代表性的NDV株进行核苷酸、氨基 国家和地区。1985年。PPMV一1传人 2 方法 酸序列同源性分析．并绘制系统发 香港．同年我国内地从台湾省引进 2．1 病毒分离与鉴定 育进化树 的种鸽 中检 出PPMV一1．迄今．我 国 按参考文献 【3】的方法进行 3 结果 很多省份都有该病的报道并分离到 2．2 病毒毒力的测定 3．1 病毒的分离及初步鉴定 病毒[5-9]鸽新城疫已成为危害我国 鸡胚平均死亡时间fMDT)以及 三株病毒分离株在鸡胚上传代 养鸽业持续稳定发展的主要疫病之 鸡脑 内接种指数(ICPI)：按参考文献 后血凝价均为 2，鸡