研究生学术交流2.ppt

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研究生学术交流2

文献点评 张晓飞 11.12 MH++C→ M+ CH+ Laser flash ionize matrix molecules Time of flight: small large High concentration inocula Lack of previous inactivation 多重耐药的结核分支杆菌在全球传播,需快速鉴定; 非结核分支杆菌在呼吸道标本中比例升高:52.5%; 分支杆菌多于120种 专性人类病原菌:麻风分支杆菌 结核分支杆菌复合群:MTC 条件致病分支杆菌:鸟、脓肿分枝杆菌 方法 不足 a,镜检 培养时间长,经验积累,易出错 b, HPLC 未被广泛接受 c,分子技术 基于PCR的杂交和测序 实时PCR 需特殊技术培训,仪器贵 建立灭活方法; 寻找减少菌株用量的试剂; 加快结核分支杆菌和非结核分枝杆菌的诊断。 Ⅰ.灭活方法 A. 95℃水浴1h B. 70%乙醇10min Ⅱ提取溶剂的选择 Ⅲ. 评价灭活方法和提取溶剂的选择 选取代表菌株: 11株代表MTC 7个种;12株代表MAC 11个 种;20株代表其它分枝杆菌的16个种 。 重新鉴定: 灭活效果:相同 图谱效果:70%乙醇﹤水浴 最终方法:菌悬液+0.5%吐温20水浴1h →水洗2次→离心10min →玻璃珠磨碎→离心10min →70%甲酸+乙腈→离心→点样 最低检测浓度:10∧5 CFU/mL的菌悬液 使数据库增加至62种非结核分支杆菌 文献报道的方法,可使MALDI-TOF MS作为临床鉴定分支杆菌的一线方法。

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