福建农科院生物技术中心农业环保技术研究室.pdf

编号： 农环组菌字 [2004-03-01], 共 4 页 承担单位：福建省农科院生物技术中心 课题编号：2002AA244031 课题名称：促生、抗逆、防治病虫的多功能生化-生物制剂的研制与应用 课题负责：陈靠山 子课题名：设施蔬菜病虫生物-化学协同控制技术研究 子课题号：2002AA244031-2 子课题人：刘波、郑伟文 子项目名： 项目主持： 子项目-2：2002AA244031-2-n 试验项目：蜡蚧轮枝菌室内防治蚜虫试验 试验人员：葛慈斌 试验负责：葛慈斌 报告日期：2004 年 3 月 1 日 计数月份：2004. 3（1） 福建省农科院生物技术中心 农业环保技术 研究室 电话: 7835334, 传真: 7809378 第 ２ 页 共 4 页 试验报告 ２ 1．试验目的 蚜虫是同翅目的一个重要类群，发生种类多，繁殖速度快，对作物危害严重，因此开展对蚜虫 的防治工作意义重大。昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌（Verticillium lecanii）的寄主范围广泛，主要寄生在 介壳虫、粉虱、蚜虫、蓟马等多种害虫，还能寄生于鞘翅目、鳞翅目等害虫（Hall ，1981；Vestergaard ， et al，1995）。作为微生物杀虫剂，已被多个国家应用于蚜虫、粉虱等害虫的防治。蜡蚧轮枝菌不同 菌株间的生长特征和毒力存在着差异，不同菌株在毒素种类和产量方面也有差异。本试验用浸叶法 测定了本研究室保存的 3 株蜡蚧轮枝菌对蚜虫的毒力，现将试验结果介绍如下。 2 ．试验方法 2.1 材料：供试菌株为本研究室保存的 3 个蜡蚧轮枝菌菌株（vl-2002、vl-2004 和 vl-3411，其 中 vl-2004是从被 vl-2002 感染的粉虱上分离获得的），供试蚜虫饲养在本研究室的温室内。 2.2 配制18瓶查贝克发酵培养基，配方：蔗糖 3.0%，NaNO 0.2%，酵母粉 0.5%，K HPO 0.1% ， 3 2 4 MgSO 0.05% ，KCl 0.05% ，FeSO 0.001% ，pH7.0-7.2 ，分装在250ml的三角烧瓶内，每瓶 50ml，高 4 4 压灭菌。 2.3 蜡蚧轮枝菌的发酵培养：分别向长有这 3 株轮枝菌的试管斜面内加入 12ml 无菌水，收集试管 内的菌丝和孢子；用无菌纱布过滤除去菌丝碎片后，计悬液的孢子数，将 3 种孢子悬液调至同一浓 度；分别吸取 1ml 的孢子悬液，接种到发酵培养基内，120rpm、26℃下振荡培养。 2.4 7d 后，停止发酵。用干燥的无菌纱布过滤发酵液，收集菌丝体，烘干后称重；计滤液的孢子 数；取部分孢子浓度较高的那 2 个菌株发酵液，稀释至与第 3 个菌株一致的浓度，制备成 20ml，备 用。 2.5 供试蚜虫的准备：从温室的甘蓝叶片上挑取 30只无翅成蚜到甘蓝叶碟上（叶碟直径为 6.0cm， 放置在塑料培养皿内，皿底覆盖一层 0.7%的琼脂），放置在人工气候箱内培养，24h后用于室内毒力 试验。 2.6 对蚜虫的毒力试验分为 5 处理：同一孢子浓度的 3 个菌株发酵液、菌株 vl-2002 和vl3411的 发酵液原液（菌株 vl-2004 发酵液的孢子浓度最低）。 2.7 在各处理液中加入少量吐温-80 至终浓度为 0.05%，将附着有蚜虫甘蓝叶碟在各处理液内浸渍 5sec 后，自然风干，挑取大小适中的一龄蚜虫到新的甘蓝叶碟（Ф=2.0cm）上，放置在塑料培养皿 内（皿底预先加有 0.7%的琼脂，皿盖钻有小孔，覆盖着纱网），再把培养皿放在人工气候箱中（26 ±1℃，L：D=14：10），连续 7d，每天定时观察，及时移出蚜尸，放置在 PDA 培养基平板上，确认 有轮枝菌长出的蚜尸为有效死蚜。各处理重复 3 次。用DPS软件进行死亡率的显著性差异比较。 第 ３ 页 共 4 页 试验报告