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实验8 微丝染色和形态观察
微丝染色及形态观察;[目的要求];[实验原理]; 当细胞用TritonX-100溶液处理,能够溶解质膜结构中及细胞内许多蛋白质,而细胞骨架中的蛋白质却不被破坏,经固定和考马斯亮蓝(非特异性蛋白质染料)染色后,胞质背景着色弱,微管等蛋白结构在光镜下无法分辨,在光镜下观察到主要是由微丝组成的应力纤维。
应力纤维由平行排列的微丝组成,体外培养的贴壁细胞应力纤维尤为发达,形态长而直,常与细胞长轴平行并贯穿细胞全长。
;榷舜郑忱盘艘驳蝇哈绥吟漱探屉纯屯涌络肿颜笛皋瑰敦葵农烁赔柒棉冀复实验8 微丝染色及形态观察实验8 微丝染色及形态观察; 微丝在细胞内的分布特征;[实验用品];[实验步骤];
(3)稳定 吸弃Triton X-100,立即用M-缓冲液轻轻地洗涤3次。
(4)固定 略晾干,在3%戊二醛液中固定10min,再以 PBS液洗3次,洗去固定液。
(5)染色 滴加3-5滴0.2%考马斯亮兰染液染色
10 min,然后小心的用自来水漂洗。
(6)观察 留取少量水分封片于载玻片,吸水
纸吸去多余的水。光镜下观察临时装片。
;[实验结果]; 光学显微镜下微丝分布图; [注意事项];[作业与思考题]
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