转化和重组筛选.pptVIP

实验六 转化及重组子的筛选 ;实验目的 2. 实验原理 3. 实验仪器、材料与试剂 4. 实验步骤 5. 实验结果与讨论;实验目的;实验原理;转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。进入细胞的DNA分子通过复制、表达，实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。 将经转化后的细胞在选择性培养基中培养，即可筛选出转化体(transformant)，即带有异源DNA分子的受体细胞。 ;基因导入方法: 1)电击法 (Gene transfer by electroporation) ;;Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell ;Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium;DNA重组;外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑，无外源基因插入的细菌呈蓝斑。;Alfa互补;实验仪器、材料与试剂;（二）材料 1. 实验四所得连接产物 2. 实???五制备的大肠杆菌感受态细胞 ;（三）试剂 1. LB固体培养基 2. 氨苄青霉素（Amp） 100mg/ml ;实验步骤;4．取适量菌液涂布LB平板(含Amp 50μg/ml)，室