运动神经元病体外器官模型的建立 - 北京大学学报(医学版).pdf

北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） ·!’8 · P=O9F() =H VEbFK OFcE9*YG（DE()YD *NEFNE* ） c/0$ ’2 F/$ # (QS$ #%%- ·论著 · 运动神经元病体外器官模型的建立 ! ! ! ! ! ! # # 刁增艳 ，沈 扬 ，樊东升 ，郑 梅 ，崔金琰 ，孙阿萍 ，宋德懋 ，范少光 （!$ 北京大学第三医院神经内科，北京 !%%%’ ；# $ 北京大学基础医学院生理学系） ［摘 要］目的：利用微孔膜器官型脊髓组织片培养的方法，加入适当剂量的线粒体功能抑制剂丙二酸钠，造成选 择性运动神经元数目减少从而建立肌萎缩侧索硬化症（()* ）的体外器官模型。方法：取出生后+ 天的*, 乳鼠的 腰段脊髓冠状切片后将脊髓片置于微孔膜上进行培养，首先经丙二酸钠量效检测确定最佳丙二酸钠剂量。在培养 第’ 天时加入适量的丙二酸钠，维持此浓度继续培养至第!- 天时结束培养，并利用免疫组化方法行运动神经元及 中间神经元计数。结果：经丙二酸钠量效检测后确定# ../01 ) 为最佳加入剂量（存活率为2-3 ，! 4 % $ %! ）。造模 实验结果显示，对照组的脊髓片内的运动神经元数目为每半侧（!-5 #6 7 !$ 2% ）个，丙二酸钠组为每半侧（!!$ %% 7 # $ 8- ）个，两组比较差异有统计学意义（! 4 % $ %! ）；两组中间神经元的数目略有减少，但两组间差异无统计学意义。 结论：利用微孔膜进行器官型脊髓片培养并加入# ../01 ) 丙二酸钠造成的此病理模型符合运动神经元病患者的 特点，可重复性强，适用于()* 的发病机制、治疗等方面的研究。 ［关键词］肌萎缩侧索硬化；器官培养；脊髓；运动神经元 ［中图分类号］ 928+5 8 ［文献标识码］( ［文章编号］!+2 !:!+2;（#%%- ）%#:%!’8:%- !#$%’()*+# ,- #(* ,./$+,#01’2 ),3* ,- $)0,#.,1(’2 $#*.$ 2*.,’ -.,) #(* 45 .$# ’1’+$ 2,.3 ,(= ?@A:BC@! ，*DEF GC@A! ，H(F ,/@A:IJ?@A! ，DEFK L?M! ，NO PM@:BC@! ，*OF (:QM@A! ，*=FK ,?:.C/# ，H(F *JC/:ARC@A# （!$ ,?QCST.?@T /U F?RS/0/AB ，V?WM@A O@MX?SIMTB YJMSZ D/IQMTC0 ，[?M\M@A !%%%’ ，NJM@C ；# $ ,?QCST.?@T /U VJBIM/0/AB ，V?: WM@A O@MX?SIMTB *]J//0 /U [CIM] L?ZM]C0 *]M?@]?I ） 674896:8 ;%*2#’=* ：Y/ ?ITC^0MIJ C@ # $%’ ./Z?0 /U C.B/TS/QJM] 0CT?SC0 I]0?S/IMI （()* ）US/. TJ? /SAC@/TBQM] ]R0TRS? /U *, SCTI ’0R.^?S IQM@C0 ]/SZ M@ZR]?Z ^B TJ? .MT/]J/@ZSMC0 M@JM^MT/S ，.C0/@CT? I/ZM: R.$ *#(,3 ：YJ? 0R.^?S IQM@C0 ]/SZ QS?QCS?Z US/. TJ? +:ZCB:/0Z *, SCTI _CI ]RT M@T/ ’-% !. ]/S/@CSM: 0B ，]R0TRS?Z /@ TJ? LM00M]?00:NL M@I?STI _JM]J .CW? TJ? IQM@C0 ]/SZ ]R0TRSM@A /@ TJ? M@T?SUC]? ^?T_??@ CMS C@Z U0RMZ$ HMSIT ，TJ? /QTM.R. .C0/@CT? I/ZMR. Z/I? _CI Z?T?S.M@?Z ^B CZZM@A ZMUU?S?@T Z/I?I M@T/ TJ? .?ZMR. C@Z ]/R@TM