成熟和未成熟小腔游仆虫生长情况对比.pdfVIP

成熟和未成熟小腔游仆虫生长情况对比1 1 2 2 徐安毕 ，吕建华 ，芜为，梁晓亮，秦培武，张西玲，李佳音，杨铁 1 中国热带农业科学院，海口（571101 ） 2 中国科学院动物研究所，北京（100080 ） E-mail ：xuhui820206@163.com 摘 要：小腔游仆虫是真核生物中很特殊的一个分支，有核器二型性、大核发育、大核 基因的结构特点、密码子不通用性、细胞周期差异性和组蛋白特异性，另外，可以利用 原生动物来改造水环境，所以，吸引了越来越多的科研人员对它进行研究，但对于其生 长情况研究，目前报道较少，关于成熟和未成熟小腔游仆虫生长情况对比，对小腔游仆 虫其他的特异性研究做好了原料资源采集的基础，也是获得良好生长状态游仆虫的关键。 关键词：纤毛虫，游仆虫，成熟，未成熟，生长曲线 分类号：Q78 在真核生物进化过程中，纤毛虫是很特殊的一个分支，其细胞具有很多明显的特异 性。例如，在同一个细胞中具有2种功能动态互补的细胞核(FokinOssipov，1981)；有些 纤毛虫的染色体在大核发育过程中被删减、重排成基因大小片段(gene ．sized fragments) 的DNA ，且1个片段通常就代表1个基因(如腹毛目)[1]。这些特异性为基因功能研究提供 了十分便利的条件，因此利用纤毛虫进行相关研究的工作越来越受到生物学家的重视与 关注。以纤毛虫小腔游仆虫为例，对成熟和未成熟的游仆虫生长情况进行对比研究，对 于获得良好生长状态游仆虫，以及水环境的改善[6]，意义重大。 小腔游仆虫的连续无性生殖能力是有限的，从一个幼年细胞不停的连续繁殖，直到 死亡大约可以经历几百个世代。在这一过程中，游仆虫从未成熟到成熟（大概一个月左 右），再到衰老，最终死亡[2]。但如果人为改变衰老细胞的生长环境，例如温度，湿度， 盐度，光照，食物等，就会促使其进行有性生殖（接合生殖），即一个小核基因重组，大 核分化的过程，细胞便又进入年幼的未成熟状态，恢复正常的生长，避免了衰老和死亡。 因此，可以说，接合生殖是一个可以让细胞永葆青春的方法。我们就利用了游仆虫的这 一特征，采用饥饿的方法，获得了两种不同状态下的细胞（成熟和未成熟）。再利用宏观 计数和微观计数的方法对两者生长状况的生物学特征做了初步的对比和探讨。旨在为探 索游仆虫细胞的衰老机制提供一定的理论依据。 1. 材 料 小腔游仆虫：法国巴黎南大学细胞生物学实验室 四膜虫：法国巴黎南大学细胞生物学实验室 倒置相差荧光显微镜（Olympus IX71 ）：Olympus公司 光学显微镜（XTS20G ）：福凯仪器 离心机（GS–6K ）：BECKMAN公司 2. 方 法 2.1 游仆虫的喂饲 游仆虫的培养与其他原生动物很不相同，它们在确定成分培养基中不能繁殖。必须有机 1本课题得到国家自然科学基金项目的资助。 - 1 - 体食物培养。可以用绿梭藻作有机食物培养，也可以用四膜虫或者细菌，我们采用四膜 虫喂饲游仆虫，采取少食多餐的原则，即在喂饲后的 1～2 小时将虫液中剩余的四膜虫用 毛细吸管（可由普通吸管在酒精灯上加热，经两次拉制而成）吸弃，这需要在光学显微 镜下操作，并注意尽量不要吸入游仆虫，随后加入新鲜的矿泉水，并且在一天内多次喂 食（一般 3 次左右）[3]。 2.1.1 四膜虫培养基的制备 蛋白胨：100g 酵母提取物：10g 葡萄糖：20g 氯化钠：0.3g 蒸馏水：1000mL 混合，用恒温磁力搅拌器搅拌均匀，并调pH值到7.0，高压蒸汽灭菌。 2.1.2 四膜虫虫液的制备 将制得的四膜虫培养基接种四膜虫后放入人工气候箱，20 ℃恒温培养2～3天。离心 收集虫子，加矿泉水和煮熟的鸡蛋蛋黄