淫羊藿甙对小鼠主要器官结构和功能的影响研究-中国试验动物学报.docVIP

淫羊藿甙对小鼠主要器官结构和功能的影响研究 张庆德 程国富 王德海* （华中农业大学动物医学院，湖北 武汉，430070） 摘要：目的：以淫羊藿甙（ICA）为供试药物，研究其对小鼠器官结构和功能的影响。方法：100只6周龄健康SPF级昆明系小鼠随机分为两组，分别灌服ICA和生理盐水，在试验第0、1、4、7、10、13、16、19天采血取血清，进行血清生化指标（AST、ALT、ALP、LDH）的检测；剖杀后取心、肝、肺、肾进行组织学观察。结果：ICA对小鼠血清生化指标具有一定的调节作用，表现为使血清中AST和ALT水平升高，降低血清中的ALP和LDH水平，但组织学观察则未见异常。结论：ICA对小鼠主要器官功能与组织结构影响较小。 关键词：淫羊藿甙；生化指标；组织学；小鼠 淫羊藿是我国传统的补益类中药，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的作用，而淫羊藿甙（icariin，ICA）为淫羊藿黄酮类提取物的主要成分，现代药理学研究发现ICA具有增强机体免疫力，抗肿瘤抗氧化，促进组织蛋白质的合成，促进成骨细胞生长和抑制破骨细胞活性等双向调节骨代谢的作用[1]，且毒副作用小，是临床常用药之一。但ICA在体内发生药理作用的过程中，其对主要器官的结构和功能的影响如何，目前未见研究报道。为了探明ICA对机体的影响，本试验通过对小鼠灌服ICA，检测血清生化指标的动态变化，并对心、肝、肺、肾组织进行组织学观察，观察ICA对机体器官结构和功能的影响，为ICA应用于临床提供实验依据。 1 材料 1.1 实验动物 5周龄健康SPF级昆明小鼠100只，体重20-22g，购自武汉生物制品研究所SCXK（鄂）2008-0003，自由采食和饮水，饲养观察一周后进行实验。 1.2 仪器设备 光学显微镜（Nikon公司80i型）；半自动生化分析仪（Biotecnica Instruments公司Photometer BT—224型）；组织细胞形态学分析系统（Nikon公司Nis-Elements D型）。 1.3 试剂及药品 ICA购自陕西西安飞达生物技术有限公司，纯度为98.36%，批号为F临用前用75%乙醇溶解，待乙醇挥发后用生理盐水稀释至5mg/ml，4℃保存备用。乳酸脱氢酶 （LDH，批号110341）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST，批号110311）、碱性磷酸酶（ALP，批号110381）、丙氨酸氨基转换酶（ALT，批号110351）试剂盒，购自中生北控生物科技股份有限公司。 2 方法 2.1 实验设计 根据预试验结果对本试验进行设计。将100只6周龄健康SPF级昆明小鼠随机分为两组：对照组50只，按0.4ml/d灌服生理盐水；实验组50只，按0.4ml/d灌服含ICA的生理盐水，ICA的终浓度为100mg/Kg体重，连续灌服。在试验开始后第0、1、4、7、10、13、16、19天2组分别随机选取5只小鼠采血取血清，立即进行血清生化指标的检测；取心、肝、肺和肾脏放入10%福尔马林液中固定，待统一进行组织病理学观察。 2.2 血清生化指标的检测 小鼠采血后立即分离血清并进行血清生化指标的检测，样本测定严格按照试剂盒说明书进行。 2.3 器官的组织学观察 将浸泡于10%福尔马林固定液中的小鼠心、肝、肺和肾脏，修整标号，制备石蜡切片，HE染色，光学显微镜进行组织学观察，照相。 基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金资助（2010QC005）。 作者简介：张庆德（1961-），男，讲师，从事实验动物饲养与管理工作，电话：027E-mail： qdzhang@mail.hzau.edu.cn。 *通讯作者：王德海，E-mail:wangdehai@mail.hzau.edu.cn 2.4 数据处理 应用统计学分析软件SPSS处理试验数据，并用t检验进行显著性检验。 3 结果 3.1 ICA对小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶的影响 小鼠在灌服ICA后，血清中的AST水平呈现逐渐升高的趋势，并在实验开始后第7d和13d与对照组相比差异极显著（P﹤0.01），在第10d与对照组相比差异显著（P﹤0.05），随后一直保持在较高的水平。血清中的ALT水平在实验初期呈上升趋势，在实验开始后第1d和4d显著的高于对照组（P﹤0.01），在第4d达到最大值，随后逐渐下降，（见）。 1 ICA对小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶的影响 1 The effect of ICA on AST and ALT in serum of mice 注：与对照组相比*P﹤0.05；** P﹤0.01 3.2 ICA对小鼠血清碱性磷