试验十一蠕虫学完全剖检术及蠕虫标本的采集与制作1.docVIP

实验十一 蠕虫学完全剖检术及蠕虫标本采集与制作 一、实验目的及要求 掌握寄生虫完全剖检法，通过剖解采集家畜的全部寄生虫标本，并进行鉴定和计数，为诊断和了解蠕虫病的流行情况，防治和研究寄生虫病提供科学依据。 二、实验器材 解剖刀，解剖剪，镊子，标本瓶，体视显微镜，透视显微镜，贝尔曼法装置。瓷盆、瓷量杯、带胶皮头玻璃滴管、玻璃烧杯、载玻片、盖玻片、普通玻璃块、铁水桶、肥皂粉、毛巾。 药品 生理盐水、20%福尔马林、10%福尔马林 、5%福尔马林、70%酒精、1%盐水等 三、实验方法、步骤和操作要领 根据实际工作中的要求不同，蠕虫学剖检术①食道。 先检查食道的漿膜面，观察食道肌肉有无体，必要时可取肌肉压片镜检。用筷子仔细食道用小刀或裁玻片刮取粘膜表层，压在两块载玻片之间检查，当发现虫体时，揭开上面的载玻片，虫针将虫体挑出。②胃。 应先检查胃壁外面。对于单胃动物，可沿胃大弯剪开，将内容物倒在指定的容器内，检出较大的虫体。然后用1%的盐水将胃壁洗净，取出胃壁并刮取胃壁粘膜的表层，把此刮下物放在两块玻片之间作压片镜检。洗下物应加1%的盐水，反复多次洗涤，沉淀，等液体清净透明后，分批取少量沉渣，洗入大培养皿中，先后放在白色或黑色的背景上，仔细观察并检出所有虫体。在胃内寄生的有马的胃线虫、胃蝇蛆、马蛔虫，猪的蛔虫，猪鸡的棘头虫，多种动物的颚口虫和毛园线虫等。如有肿瘤时可切开检查。 对反刍兽可以先把第一、二、三、四胃分开。检查第一胃时注意检出胃粘膜上的虫体，然后注意观察与胃壁贴近的胃内容物中的虫体，发现虫体全部检出来，胃内容物不必冲洗。第二、三胃的检查方法同第一胃，但对第三胃延伸到第四胃的相连处要仔细检查，必要时可以把部分切下，采取同第四胃的检查方法。第四胃的检查方法同单胃动物胃的检查方法。 ③肠系膜分离前先以双手提起肠管，肠充分展开，然后对着光线从十二指肠起问后依次检查，看静脉中有无虫体寄生，分离后剥开淋巴结，切成小块，压片镜检。④小肠。 把小肠分为十二指肠、空肠、回肠3段，分别检查。先将每段内容物倒入指定的容器内，再将肠壁翻转（即将肠浆膜内翻入肠腔内，使其粘膜面翻到外面）。然后用1%盐水洗涤肠粘膜面，仔细检出残留在上面的虫体，洗下物和沉淀物分别用反复沉淀法处理后，检查沉淀物中所有的虫体。看是否有毛圆线虫、钩虫、蛔虫、旋毛虫、同盘吸虫、华支睾吸虫、棘头虫以及寄生于各种动物的相应的绦虫、胃蝇蛆和球虫寄生。 ⑤大肠。 大肠分为盲肠、结肠和直肠3段，分段进行检查。在分段以前先对肠系膜淋巴结进行检查。在肠系膜附着部的对侧沿纵轴剪开肠壁，倾出内容物，以反复沉淀法检查沉淀物内寄生虫，对叮咬在肠粘膜上的寄生虫可直接采取，然后把肠壁用1%盐水洗净，仍用反复沉淀法检出洗下物中所有的虫体，已洗净的肠粘膜面再作一次仔细检查，最后取肠粘压片检查 ⑥肝脏。 首先观察肝表面有无寄生虫结节，如有可作压片检查。然后沿输胆管剪开肝脏，检查有无寄生虫，其次把肝脏自胆管的横断面切成数块放在水中用两手挤压，或将其撕成小块，置37℃温水中，待其虫体自行走出（即贝尔曼法原理）。充分水洗后，取出肝组织碎块并用反复沉淀法检查沉淀物。对有胆囊的动物要注意检查胆囊，可以先把胆囊从肝上剥离，把胆汁倾入大平皿内，加生理盐水稀释，检出所有的虫体最后检查胆汁，粘膜上有无虫体附着，也可用水冲洗，把冲洗后的水沉淀后，详细检查。 ⑦胰腺。 用剪刀沿胰管剪开，检查其中虫体，而后将其撕成小块，用贝尔曼法分离虫体，并用手挤压组织，最后在液体沉淀中寻找虫体。 ⑧脾脏。 检查法与胰腺相同。 （2）泌尿系统检查及寄生虫采集。 骨盆腔脏器亦以与消化系统同样的方式全部取出。先行眼观检查肾周围组织有无寄生虫。注意肾周围脂肪和输尿管壁有无肿瘤及包囊，如发现后切开检查，取出虫体。随后切取腹腔大血管，采取肾脏。剖开肾脏，先对肾盂进行肉眼检查，再刮取肾盂粘膜检查，最后将肾实质切成薄片，压于两玻片间，在放大镜或解剖镜下检查。剪开输尿管、膀胱和尿道检查其粘膜，并注意粘膜下有无包囊。收集尿液，用反复沉淀法处理。检查有无肾虫的寄生。 （3）生殖器官的检查及寄生虫采集。 检查内腔，并刮取粘膜表面作压片及涂片镜检。怀疑为马媾疫或牛胎儿毛滴虫时，应涂片染色后油浸镜检查。 4．胸腔各器官的检查及寄生虫的采集。 胸腔脏器的采取，按一般解剖方法切开胸壁，注意观察脏器表面有无寄生虫蚴及其自然位置与状态，然后连同食管及气管采取胸腔内的全部脏器，并收集储留在胸腔内的液体，用水洗沉淀法进行寄生虫检查。 （1）呼吸系统检查及寄生虫检查（肺脏和气管）。 从喉头沿气管、支气管剪开，注意不要把管道内的虫体剪坏，发现虫体即应直接采取。然后用载片刮取粘液加水稀释后镜检。再将肺组织在水中撕碎，按肝脏处理法检查沉淀物。对反刍兽肺脏的检查应特别注意小型肺线虫，可把寄生性结