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补体结合实验(CFT)
补体结合实验(CFT)
新乡医学院免疫学教研室
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补体结合实验
一、原理
CFT是根据任何抗原抗体复合物可激活、固定补体的特性,用一定量的补体与致敏红细胞来检测抗原、抗体间有无特异性结合的一类实验。
1、参与本实验的成分包括
①已知抗原(或抗体)
②待检抗体(或抗原)
③SRBC
④SRBC相应的溶血素
⑤补体
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补体结合实验
2、参与本实验的五种成分分为两个系统
①待检系统:已知抗原(或抗体)和待检 抗体(或抗原)
②指示系统: SRBC和SRBC相应溶血素
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(Ag+Ab)+补体
双方不相对应(或缺少一方)形不成IC
不能激活并固定补体
加入SRBC和溶血素
出现溶血
双方相对应形成IC
激活并固定补体
加入SRBC和溶血素
不出现溶血
补体结合实验
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补体结合实验
二、材料
Ag:1:10稀释的伤寒杆菌
1:10稀释的痢疾杆菌
Ab: 1:10稀释的伤寒诊断血清
补体
2%SRBC
溶血素
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补体结合实验
三、操作方法
①加样(如下图),37度水浴箱15分钟
试管号
伤寒血清
伤寒杆菌
痢疾杆菌
补体
NS
1
0.2ml
0.2ml
******
0.2ml
******
2
0.2ml
******
0.2ml
0.2ml
******
3
0.2ml
******
******
0.2ml
0.2ml
4
******
0.2ml
******
0.2ml
0.2ml
5
******
******
******
0.2ml
0.4ml
6
******
******
******
******
0.6ml
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补体结合实验
②各管中加SRBC0.2ml、溶血素0.2ml,37度水浴箱15-30分钟
③观察结果
四、结果
试管号
名称
结果
1
试验管
不溶血
2
特异性对照
溶血
3
血清对照
溶血
4
抗原对照
溶血
5
补体对照
溶血
6
溶血素对照
不溶血
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