S100 100AA4：潜在抑制膀胱癌干细胞的靶分子.PDFVIP

J South Med Univ, 2017, 37(7): 869-874 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2017.07.03 ·869 · 基础研究 SS100100AA44 ：：潜在抑制膀胱癌干细胞的靶分子潜在抑制膀胱癌干细胞的靶分子 1 2 2 2 2 2 王春燕 ，聂庆文 ，周 璇 ，黄大雄 ，肖炜强 ，朱永通 1 2 南方医科大学中西医结合医院脑病科，广东 广州 510315；南方医科大学南方医院// 第一临床医学院妇产科 生殖中心，广东 广州 510515 摘要：目的应用siRNA技术沉默S100A4 基因表达对膀胱癌干细胞增殖及成瘤能力的影响。方法 筛选鉴定出MB49 膀胱癌干 细胞后，应用核素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术，发现MB49 膀胱癌细胞与膀胱癌干细胞表达差异的蛋白质S100A4 蛋 白。设计并合成S100A4 基因特异性的siRNA序列，转染膀胱癌干细胞，应用Western blot 和qPCR 检测在siRNA 对S100A4 的 影响，体内、外实验观察siRNA抑制S100A4 后对膀胱癌干细胞增殖及成瘤能力的影响。结果 通过iTRAQ 核素标记结合液相 色谱和串联质谱分析，共鉴定出差异蛋白共65个，S100A4 在基因表达水平差异最显著（差异为5.70 ，P0.05）。与空白对照组、 阴性对照组相比，S100A4 siRNA 转染组的S100A4 基因和蛋白表达降低（P0.05）。CCK8实验和裸鼠成瘤实验发现，与空白对 照组与阴性对照组相比较，siRNA 干扰S100A4 表达后，膀胱癌干细胞生长明显受到抑制，成瘤能力受到抑制（P0.05）。结论 膀胱癌干细胞中S100A4 表达与膀胱癌的复发、转移有关，S100A4 蛋白可能成为消灭膀胱癌干细胞，治疗膀胱癌的分子靶标。 关键词：膀胱癌干细胞；S100A4 ；增殖；成瘤 S100A4, a potential therapeutic target on bladder cancer stem cells 1 2 2 2 2 2 WANG Chunyan , NIE Qingwen , ZHOU Xuan , HUANG Daxiong , XIAO Weiqiang , ZHU Yongtong 1Department of Neurology, Integrated Hospital of Traditional Chinese Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510315, China; 2Reproductive Medicine Center, Department of Obstetrics and Gynecology, Nanfang Hospital/First School of Clinical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To observe the effect of S100A4 gene silencing mediated by small interfering RNA (siRNA) on the proliferation of bladder cancer stem cells (CSCs) and their capacity of xenograft tumor formation. Methods MB49 bladder cancer stem cells (MCSCs) were isolated and identified. The differentially expressed protein S100A4 was identified in MCSCs using isobaric tags fo