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一种全新用于纯化人IgG的亲和层析树脂的鉴定
一种全新用于纯化人IgG 的亲和层析树脂的鉴定
Johan Färenmark, Stefan D Eriksson, Hanna Wlad, Elin Rann Wobbeking, Faramarz Alamravesh and Patrik Adielsson
瑞典乌普萨拉通用电气医疗集团生物科学AB, SE-751 84
介绍 从血清中纯化IgG
对于生物制药行业来说,从不同的原料中纯化 IgG 是非常重要的一环。鉴于对回收率和安全性的要求不断提高,选择层析技术进行血浆分离 通过从人血清中一步纯化IgG 的例子可说明新树脂的效力。不同体积的血清包含了相当于70 和80%动态结合能力的IgG ,分别在实验1 和实验2 上样。纯化期间的流速均为250 cm/h ,相当
制备抗体的需求日益增多,还出现了利用转基因技术开发人源抗体生产的新方法。亲和层析的应用有可能缩减获得高纯度 IgG 所需的操作步 于停留时间为2.4 分钟。洗脱组分和上样材料中IgG 的亚型分布由商业化的ELISA 试剂盒(Zymed )确定,洗脱的IgG 纯度由凝胶电泳检测。
骤。因此,通用电气医疗集团的定制设计填料最新开发出 IgSelect,将一种全新的亲和配体固定于现代高性能的琼脂糖基质上。这种人 IgG
特异的配体是由Bio Affinity 公司(BAC)开发的,对全部四种IgG 亚型均有亲和性。通过以下从人血清中纯化IgG,以及在转基因制备抗体应 图3. 实验2 的层析图。
用中去除宿主蛋白的案例中可以证明新树脂的有效性。 柱:Tricorn 5/100,床高10 cm
流速:250 cm/h,相当于2.4 分钟停留时间
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