脑胶质瘤患者手术前后血清内皮抑素表达及对比研究.docVIP

脑胶质瘤患者手术前后血清内皮抑素表达及对比研究【摘要】 目的 研究手术前后人脑胶质瘤患者血清内内皮抑素(ES)的表达程度和临床意义。方法 检测术前术后脑胶质瘤患者体内血清中内皮抑素的表达程度，采用ELISE方法检测46例患者。于此同时抽取9例健康人的血清标本来进行正常对照。结果 在健康人的血清内，ES平均的含量在19.26ng/ml到22.22ng/ml之间。而神经胶质瘤患者在手术之前体内血清中ES的平均含量可达21.00ng/ml到32.26ng/ml之间，而且胶质瘤的恶性程度越高，患者血清内ES的含量也越高。结论 术后5、6 d之后，胶质瘤患者血清内ES含量平均在17.38ng/ml到26.16ng/ml之间，比手术前明显偏低。结论 内皮抑素在血清中的含量可以反映出肿瘤生长的情况，并且还和肿瘤的恶变程度和患者的预后有着关系。 【关键词】 胶质瘤；内皮抑素；血清 胶质瘤是一种含血管丰富的肿瘤，较高的血管化以及血管内皮细胞的增生则是恶性胶质瘤的主要特征［1］。增生的内皮细胞可导致心血管的形成，这与肿瘤的恶性程度临床复发的概率以及生物提的侵袭性都有着密切关系。所以就有专家提出胶质瘤的最适宜治疗方案是抗血管生成治疗［2］。而目前已经知道的抗血管生成因子中作用最强的是内皮抑素(ES)，它具有抑制血管内皮细胞生长的特异性，能够有效地阻碍血管的生成以及抑制肿瘤的生长。通过采用ELISE方法，本研究检测不同恶性程度胶质瘤患者体内的学清中Endostatin的含量，并比较术前和术后的水平。旨在探讨胶质瘤的恶变程度和预后与Endostain的关系，为基因治疗应用Endostain奠定基础。 1 资料与方法 1.1 一般资料 取经病理证实并且已经手术切除的脑胶质瘤患者46例，女15例，男31例，年龄15～64岁，平均年龄为41.6岁。根据WHO在1990年制定的肿瘤在中枢神经系统分类的标准，可将本次46例患者分为四个级：7例Ⅰ级；18例Ⅱ级；13例Ⅲ级；8例IV级。所有的患者都是首次接受手术切除的脑胶质瘤患者，手术前没有就受过其他的放化疗。选取健康人9例作为正常对照组。 1.2 采集及保存血清标本 分别在手术前一天和手术后五到六天进行血清标本采集。抽取清晨空腹时外周静脉血并对3 ml血清进行分离，在零下80℃环境下保存。正常对照组血清标本的采集以及保存方法方式和实验组相同。 1.3 ES在血清中的检测方法 使用的人Endostain ELISA试剂盒产自美国Rapidbio公司，根据试剂盒的参考说明书进行相关操作，在450nm处用产自瑞士的TECAN酶标仪读取OD值。以纵坐标为OD值，横坐标为标准品浓度来绘制所需要的标准曲线。根据所测得的血清样品OD值来计算ES浓度。 1.4 统计学方法 用均数±标准差(x±s)表实验结果，对数据进行分析使用SPSS 14.0软件，统计学方法为Kruskal-Wallis非参数秩和检验法和Paired-Sam ples T Test检验法。认为当P 0.05时有显著地统计学意义。认为P0.01统计学意义非常显著。 2 研究结果 手术前胶质瘤患者血清中ES平均含量为21ng/ml到32.26ng/ml之间，健康人的平均含量在19.26ng/ml到19.26ng/ml之间，此含量比胶质瘤患者的含量明显偏低，统计学上有非常显著的差异存在。手术前胶质瘤患者血清中ES的含量比手术后有非常显著地下降，认为有非常显著的统计学意义。 3 讨论 1997年哈佛大学学者从小鼠的内皮细胞瘤上分离并提纯出一种可以抑制内源性血管生长的抑制剂及内皮抑素［3］。这种物质具有抑制血管内皮细胞迁移、生长并具有诱导血管内皮细胞凋亡抑制其生长的作用。内皮抑素是一种抑制因子，它是公认的目前最有效的血管生长抑制因子之一。国际文献报告一致认为内皮抑素与肿瘤的病理特征、肿瘤的恶性程度以及患者的预后都有着紧密的关系。但是当前胶质瘤患者的血清清内皮抑素在手术前手术后的变化很少有报道。 本次研究用ELISA方法对9个健康人群以及46例患有胶质瘤的患者手术前后血清内皮抑素进行检测。检测发现患有胶质瘤患者体内血清内皮抑素含量比正常的健康人要高出许多，统计学意义非常显著。而且患者血清内的内皮抑素含量与肿瘤的恶性程度很有关系，恶性程度越高的患者体内的内皮抑素水平也越高。并且III到IV级肿瘤已经有了非常显著的统计学差异。导致这种高表达的原因可能与胶质瘤的生长过程有关系。伴随着肿瘤细胞越多、恶性程度越高和血管形成越多，为了抵抗机体这种血管和肿瘤高度生长的趋势，肿瘤细胞分泌的蛋白水解酶量会增加。所以降解肿瘤细胞核血管基底膜内胶原蛋白而产生的内皮抑素量也会随之增加。 增加的内皮抑素会随循环带到肿瘤所在部位，抑制肿瘤血管