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藻类中植物激素分离、纯化及测定
藻类中植物激素分离、纯化及测定摘?要 高等植物中的激素研究取得了大量成就,而藻类中植物激素的研究远远落后于高等植物,制约了人们对海洋植物资源的开发和利用。本文针对藻类中五种主要的植物激素(生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、乙烯)的分离、纯化及测定方法的研究状况经行概述。
关键词 藻类;植物激素;分离;纯化;测定
中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 1673-9671-(2012)082-0222-02
藻类中激素的深入研究是从上世纪七十年代才开始的,起步和研究水平都远远落后于高等植物,制约了人们对海洋植物资源的开发和利用,因此研究藻类中个的植物激素显得尤为重要。迄今为止,已有的研究表明,藻类中植物激素的情况十分复杂,高等植物中已经确定的激素有些可能在藻类中仍起激素作用,有些则不起作用。某些藻类还可能会以自己特有的激素来调节其生长和发育。目前可靠的激素分析技术,如:GC-MS、NMR等已经建立。在生物试法的基础上,经气相色谱或高压液相色谱的分离、纯化,再通过GC-MS等后续检测技术的分析检测,可以确定活性物质的化学结构,从而可以确定被检测物与已知激素的关系,或进一步分析其激素性质。本文综合当前国内外对藻类植物激素分离、纯化及鉴定的研究进展情况,对其研究状况做一较全面的概述。
1 藻类中的植物激素
广义的植物激素的定义是指任何浓度上低于营养物质而能影响生长发育的化学物质。目前已经广泛公认的植物激素有五大类,分别是生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、脱落酸类和乙烯。这些激素协同作用,调节植物体各部分的生长速率和不同组织器官的分化,控制生殖过程,还能使成熟的植物对环境变化做出反应。但因为藻类中的植物激素含量普遍较陆地高等植物低,所以对前者的研究远不如后者系统和充分。
1.1 生长素类
最早在海藻中发现生长素的是Van Der Weiij,他用标准燕麦弯曲法在大泡法囊藻(Valonia macrophysa)的细胞壁和原生质中发现有极低浓度的生长素,但不能排除检测到的生长素是由附着于海藻上的微生物产生的。1940年,Thirmann和Scoog发现生长素在植物组织中以多种化学形式存在,但最可能的活性形式是IAA。IAA能在植物中起到快速的反应(如使细胞增长),也能起到长期的反应(如细胞分裂和分化)。后来,随着分离技术的发展和研究的深入,陆续又有一些生长素被鉴定出来。
生长素在藻体中的含量与海藻所处的发育阶段和藻体的部位有密切的关系。通常处在发育阶段和生长季节的海藻中生长素的含量较高,其合成部位主要在植物体的尖端。生长素在藻体内具有结合态和游离态两种形式,能够影响细胞形成层的活性;增强细胞膜的渗透性;诱导乙烯的生成。
1.2 细胞分裂素
细胞分类素又称细胞分裂素,它是具有生理活性的一类嘌呤衍生物。早在1969年Jennings就对昆布等褐藻和沙菜等红藻中的内源细胞分裂素的含量和其作为植物生长调节物质的作用进行了研究。自此之后,这方面的研究报道不断增多。Mooney和Van Steden在1987年使用HPLC方法分析了海藻中主要有t-玉米素、二氢玉米素、异戊烯腺苷嘌呤和t-玉米素核苷等细胞激动素。1991年日本科学家Farooqi使用NMR技术再一次证实了海藻中除了含有上述细胞激动素外还含有玉米素,玉米素核苷,6-氨甲基嘌呤等,并且证实了这些细胞激动素的活性。
细胞分裂素可以促进藻类生长、加速细胞分裂、增加蛋白质和叶绿素的含量,并可调节藻类的形态建成和再生。CTK在植物多种胁迫中起到从根到冠的信息介质的作用,温度逆境、水分亏缺、盐胁迫均使CTK含量发生变化。
1.3 赤霉素
赤霉素是一类属于双萜类化合物的植物激素。因为赤霉素都含有羧基,故呈酸性。内源赤霉素以游离和结合型两种形态存在,可以互相转化。
赤霉素能增加大型海藻的生长速率。早在60年代,科学家就已经发现了海藻中含有赤霉素类似物。生物检测发现昆布属和浒苔属的海藻有赤霉素活性,并发现了存在至少两种赤霉素GA3和GA7。
1.4 脱落酸
脱落酸又称离层酸是一种具有倍半萜结构的植物激素。它是一种较强的生长抑制剂,可抑制整株植物或离体器官的生长,对生长的作用与IAA、GA和CTK相反,并对细胞的分裂与伸长起抑制作用。
Kingman在1982年发现掌状海带中含有水溶性的植物生长抑制剂,并且性质类似于脱落酸,使用GC和GC-MS技术证实了这类物质是脱落酸。
逆境下植物启动脱落酸合成系统,合成大量的脱落酸,促进气孔关闭,抑制气孔开放;促进水分吸收,诱导抗旱特异性蛋白质合成,调整保卫细胞离子通道,诱导ABA基因改变相关基因的表达,增强植株抵抗逆境的能力。
1.5 乙烯
乙烯对藻类细胞分裂有促进作用,影响藻类
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