显示肥大细胞的一种简易染色法.PDFVIP

动物学杂志 Chi~：sc扣um Zoology 1989Z4(1) 显示肥大细胞的一种简易染色法 戴 惠 娟 (江西大学生物 系) 摘要 本文采用染血涂片的瑞特氏 (Wrlgh~)染色方法 ，染皮下疏松结持组织铺片或切片显示肥 大细胞，方法简便，背景清晰，不易退色，效果很好，且便于学生制作。井对本法的作用原理进亓，了探讨。 显示肥大细胞的染色法很多，常用的有硫 水 。从蒸馏水 中将切片取 出，让其充分晾干 (或 堇法 、甲苯胺蓝法 、中性红法 、酸性复红法、醛复 用吸水纸吸干)o 切片晾干后 的染色步骤与铺 红一奥新蓝法 、鲍鉴清天青一伊红一美蓝法和TAE 片的染色法相同。 但用蒸馏水冲 洗 后 ，须经 法等 。但作者在实验 中发现用瑞特 氏(Wri。 70％、80为 酒精 …--·逐级脱水 ，二 甲苯透 明，树 ght)染液染肥大细胞 ，方法简便 ，背景清晰，效 胶封片。经 7O％酒精时兼有分色作用，可使颜 果很好 。现作如下介绍 。 色不会过深 ，肥大细胞颗粒清楚。但注意低浓 (一)覃材固定 小白鼠或大 白鼠，用断头 度酒精 中不能久放 。 法或用乙醚麻醉后取材 。 结果 肥大细 胞颗粒 呈红紫色 ，其它细 胞 取皮下疏松结缔组织或肠 系 膜 制 成 平 铺 成分呈蓝色或红色。 片 ，晾干固定即可 。若取 胃、小肠等材料 ，刚固 (三)作用原理 肥大细胞 内的颗 粒 含肝 定于 10弼 福尔马林液 中，常规石蜡包埋切片 。 素 ，肝素是 台有硫酸基的酸性粘多糖 ，具有异染 (--)架色 染液 即通常 染血 涂 片 用 的 性。而 Wright染料是 由酸性染料伊红和碱性 Wright染液 。配制方法：取 Wright粉荆 01 染料美蓝结合而成的 中性染料 。碱性染料美蓝 克置于研蚌 内，充分研磨 ，愈细愈好 ，再将 60毫 (Methyleneblue又名亚 甲蓝 、次 甲基蓝)是具 升 甲醇逐步加入研钵 内同时研磨 ，待染料全醑 有异染性的染色剂 ，故能使肥大细胞颗粒产生 溶解为止 ，置试剂瓶中，一周后可用 ，但一个月 F型(紫)或 r型(红)的异染反应 “。 美蓝和伊 后使 用最佳 。 红 也可使背景中其它成分染成蓝色和红色。 1．铺片染色法 与血涂片 的染 色方 法 相 本法作用原理似与鲍鉴青天青一伊红一美蓝} 同。在铺片上滴加 Wrlght染液 ，使染液将材 法相 同，但本法染料配制容易，操作简便，毋需 料完全淹没，染 1分钟后 ，一滴一滴加上等量的 特别的处理。与甲苯胺蓝法相 比，则背景清晰， 蒸馏水 ，使与染液均匀混台 ，静置 5—10分钟 便于观察 。用本法染色的肥大细胞颗粒还不易 后，倾去染液 ，用蒸馏水或 自来水冲洗干净，待 退色。作者用本法和 甲苯胺蓝法同时染色的铺 干后不经封片即可镜检 。 片及切片，经十个月后镜检 ，发现甲苯胺蓝法染 结果 肥大细胞成堆分布 ，胞质 内充满蓝 色的色泽较淡 ，而本法染色的均未退色，色泽毋 ： 紫一红紫色的异染性颗粒 。 结缔组 织的其它细 很鲜艳 。 胞和纤维成分也可显示 出来，呈现为蓝色或红 此外 ，在做疏松结缔组织实验时 ，可 由学生 - 色。 当场制成铺片进行观察 ，需时很短 (15分钟左 l 2．切片染色法 切片按常 规脱 蜡 至 蒸馏 右)，效果很好 ，且培养了学生的实验操作能力。。 动物学杂志 曲i sc如urna10tZ~|ogy 19s924Cl，