顶空固相微萃取HS-SPME.PPT

固相微萃取技术概述 固相微萃取(Solid?phase?Micro-Extraction??SPME) 固相微萃取是在固相萃取基础上发展起来的,吸收了固相萃取的优点,摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂洗脱解吸附的弊病,只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理,通过色谱进样口提供能量完成解吸附和进样 。 优点:萃取、净化、浓缩、进样功能于一体,具有操作简单、所需时间短、无需溶剂、用样量少、选择性强、容易实现自动化以及易于与色谱、电泳等高效分离检测手段联用等 与SPE法相比，SPME法具有萃取相用量更少、对待测物的选择性更高、溶质更易洗脱等特点 原理 SPME的萃取机制就是待测物的样品基质和萃取介质（涂层）间的分配。固相微萃取装置由在微量进样器中插入一段涂有萃取相的石英纤维构成，当萃取达到平衡时，进入萃取相的分析物的量为： N=KfsV1CoV2/（KfsV1+V2） 其中，Co为萃取前分析物在样品中的浓度；Kfs为分析物在萃取相和试样间的分配系数； V1 为萃取相的体积；V2为样品的体积。 SPME对有机物的萃取符合“相似相溶”原则，不同的涂层萃取不同的待测物。非极性涂层如聚二甲基硅氧烷(PDMS)，对非极性物质如烃类效果良好；极性涂层如聚丙烯酸脂(PA)，对极性物质如苯酚和羧酸类的吸附非常有效；但在直接SPME中，极性涂层如要从水中萃取极性化合物，它对待测物的亲和力必须大于水对待测物的亲和力，否则效果很差。 固相微萃取的装置 SPME装置略似进样器,典型的SPME装置见右图。特制不锈钢穿透针A为中空结构，纤维固定针B和萃取纤维C能在其中移动，熔融石英纤维C上面涂布用于萃取的固定相，柱塞D控制固定针B的移动使纤维C伸出或退回穿透针中。当纤维暴露在样品中时，涂层可从液态-气态基质中吸附萃取待测物。吸附完毕后，萃取纤维C退回到穿透针中被保护起来，己富集了待测物的纤维可直接转移到仪器(气相色谱仪，液相色谱仪等)进样口，通过仪器进样口的能量解吸附，然后进行分离分析。 S P M E 有三种基本的萃取模式： 直接萃取（Direct Extraction SPME） 顶空萃取(Headspace SPME) 膜保护萃取（membrane-protected SPME） 直接萃取（Direct Extraction SPME） 直接萃取方法中，涂有萃取固定相的石英纤维被直接插入到样品基质中，目标组分直接从样品基质中转移到萃取固定相中。在实验室操作过程中，常用搅拌方法来加速分析组分从样品基质中扩散到萃取固定相的边缘。对于气体样品而言，气体的自然对流己经足以加速分析组分在两相之间的平衡。但是对于水样品来说，组分在水中的扩散速度要比气体中低3 ～4 个数量级，因此需要有效的混匀技术来实现样品中组分的快速扩散。 比较常用的混匀技术有：加快样品流速、晃动萃取纤维头或样品容器、转子搅拌及超声混匀。这些混匀技术一方面加速组分在大体积样品基质中的扩散速度，另一方面减小了萃取固定相外壁形成的一层液膜保护鞘而导致的所谓“损耗区域”效应。 顶空萃取（HS-SPME） 在顶空萃取模式中，萃取过程可以分为两个步骤：①被分析组分从液相中先扩散穿透到气相中；②被分析组分从气相转移到萃取固定相中。这种改型可以避免萃取固定相受到某些样品基质（比如人体分泌物或尿液）中高分子物质和不挥发性物质的污染。在该萃取过程中，步骤②的萃取速度总体上远远大于步骤①的扩散速度，所以步骤①成为萃取的控制步骤。因此挥发性组分比半挥发性组分萃取速度快。实际上对于挥发性组分而言，在相同的样品混匀条件下，顶空萃取的平衡时间远远小于直接萃取平衡时间。 HS-SPME 法是一个三相萃取体系，即固相(涂层)、液相(样品)、气相。Zhang Pawliszyn 等研究了HS-SPME 的扩散体系及其平衡，并建立了数学模型： n =C0V1V2K1K2 ／(K1K2V1+K2V3+V2) 其中，n 为被萃取组分的绝对量，C0 为待测物在样品中的初始浓度，K1、K2 分别是待测物在固相与气相、气相与液相间的分配系数。V1、V2、V3 分别是固相、液相和气相的体积。 可见，在涂层类型、萃取时间、萃取温度等操作条件固定的前提下，待测物在萃取涂层中的萃取量与其初始浓度一定范围内成正比。 表1 固相微萃取方式的比较Fig.1 SPME Metheds 膜保护萃取（membrane-protected SPME） 膜保护S P M E 的主要目的是为了在分析很脏的样品时保护萃取固定相避免受到损伤，与H S -SPME 相比，该方法对难挥发性物质组分的萃取富集更为有利。另外，由特殊材料制成的保护膜对萃取过程提