中药植物茅苍术抗菌活性和活性物质研究.pdfVIP

中药植物茅苍术抗茵活性及活性物质研究 专业名称：生物化学与分子生物学 申请人：钟慧 指导教师：邓业成 论文答辩委员会 主席： 乜 委员： 戮 ㈣ 中药植物茅苍术抗菌活性及活性物质研究 研究生：钟慧年级：2012级导师：邓业成 专业：生物化学与分子生物学研究方向：酶与蛋白质化学 摘要 本文以茅苍术Atractylodes et 取植物成分。以玉米大斑病菌Exserohilum Suggs、玉米小斑病菌 turcicum(Pass)Leonard et Bipolarismaydis(NisikadoMiyake)Shoeml、金桔砂皮病菌Diaporthe oleracea 甘蓝黑斑病菌AlternariaM．Ibrath、甘蔗凤梨病菌Ceratocystis Moreau、茶轮斑病菌Pestalotiopsis et et Dastur、辣椒炭疽病菌Colletotrichum miyabeanus(ItoKubibay)Drechsler capsici(syd．) Butl、贡柑链格孢菌Alternaria vatNicotianae cirri、烟草黑胫病菌Phytophthoraparasitica de (BredaHean)Tucker10种植物病原真菌为供试菌，采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测 定了茅苍术甲醇提取物的抑菌活性。通过有机溶剂萃取、硅胶柱层析、薄层层析等分离技 术，并结合活性跟踪法对茅苍术抑菌活性成分进行分离纯化。利用核磁共振谱、质谱分析 技术鉴定抑菌活性成分的结构。初步探究了活性物质的抑菌作用机理。 采用菌丝生长速率法测定了茅苍术甲醇提取物对10种植物病原真菌菌丝生长的抑制 活性。结果表明，质量浓度为lOg／L时，茅苍术甲醇提取物对其中9种供试菌的抑制率均 在70％以上，其中对玉米大斑病菌、金桔砂皮病菌和烟草黑胫病菌表现出很高的抑制活性， 进一步测定了茅苍术甲醇提取物对9种植物病原真菌的毒力。发现茅苍术甲醇提取物 菌菌丝的毒力相差较大，最大毒力(玉米大斑病菌)是最小毒力(贡柑链格孢菌)的20．72 倍，对贡柑链格孢菌菌丝的毒力最低，EC50为2．7264 g／L，对玉米大斑病菌菌丝的毒力最 高，EC50值0．13169／L。 采用孢子萌发法测定了茅苍术甲醇提取物对10种植物病原真菌孢子萌发的抑制作用。 结果表明，质量浓度为10∥L时，茅苍术甲醇提取物除了对玉米小斑病菌孢子萌发的抑制 率只有7．92％夕b，对9种供试菌的抑制率均在70％以上，其中，对玉米大斑病菌、金桔砂 皮病菌、甘蔗凤梨病菌、茶轮斑病菌、烟草黑胫病菌孢子的萌发有强烈的抑制作用，抑制 率分别为95．24％、100％、95．36％、90．11％、100％。 利用液．液萃取法将茅苍术甲醇提取物初步分成石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁 醇萃取物和水萃取物。经活性测定，发现抑菌活性成分主要存在于乙酸乙酯和石油醚萃取 物中。乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析和薄层层析分离