2017年江苏省启东市高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离（第2课时）电泳基础知识练习 新人教版选修1.docVIP

基础知识：电泳 1． A． B．蛋白质分子的形状 C． D．缓冲溶液的pH 2． (1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内____________表示。 (2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程(如下图)。 发酵液→→含酶的发酵液→→→→纯酶 　 　　↓　　　　　　　↓ 　　　菌体去除　　　透析液(Ⅰ)去除 Ⅰ中的主要成分为________；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。 (3)为制备基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：______________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。 (4)除植酸酶外，微生物还应用在__________________的生产中。 3． A． B．蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质 C． D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动 4． A． B．带电分子会向着与其电荷相同的电极移动 C．pH下，可解离的基团会带上正电或负电 D．电泳能够实现样品中各种分子的分离 5． A． 6． A． C． 7． （1）分离该抗菌蛋白可用电泳法．其原理是根据蛋日质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。 （2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。 （3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量的菌液培养基中菌落的 ，确定该蛋白的抗菌效果。 （4）细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。 8． A． C． 9． A． B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 C． D．用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小 10． ________方向的电极移动(　　) A． B．相反 C．相对 D．相向 参考答案： 1． 答案： 解析： 2． 答案： (1)(醇和磷酸的生成量) (2)小分子杂质　凝胶色谱法：根据不同蛋白质之间分子大小、吸附性质等差别进行纯化。(或电泳法：根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。) (3)变性、复性和延伸　加热 (4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶 解析： (1) (2)题干中的生产流程为酶纯化的过程。含酶的发酵液通过透析，即以半透膜过滤发酵液，使一些小分子物质被过滤掉，再通过电泳法或凝胶色谱法分离纯化混合的酶液，获取纯的植酸酶。 3． 答案： D 解析： 4． 答案： B 解析： 5． 答案： 解析： 6． 答案： 解析： 7． 答案： （4）平板划线法 稀释涂布平板法（稀释混合平板法） 灭菌 解析： （1）电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，许多重要的生物大分子，如多肽、核酸、蛋白质等都具有可解离的基团。在一定的PH条件下，这些基团会带上正电或负电，在电场的作用下根据待分离的样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同。其迁移速度不同，从而把它们分离。 （2）培养基中凡是含有C、H、O、N等元素有机物都能为细菌生长提供碳源和氮源。故牛乳膏和蛋白胨主要为细菌生长提供碳源、氮源 （3）抗菌蛋白具有抗菌能力，培养基中加入抗菌蛋白后接种等量菌液。培养一定时间后，培养基中菌落数多的，该抗菌蛋白的抗菌能力强。 （4）抗菌培养时，常用的接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。实验结束后，对使用过的培养基必必须进行灭菌处理，防止菌种进入自然环境。 8． 答案： 解析： SDS后,蛋白质分子被解聚成单条肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白质-SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异,从而达到仅根据蛋白质相对分子质量的不同来分离蛋白质的目的 9． 答案： 10． 答案： B 解析： pH作用下，生物大分子中有某些可解离的基团，这些基团会带上正电荷或负电荷，在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 3