遗传病的诊断和治疗.pptVIP

遗传病的诊断和治疗 遗传病的诊断 一般诊断（病史、症状、体征、实验室） 特殊诊断（系谱分析、染色体检查、特殊生化检测、基因诊断） 现症诊断、症状前诊断、产前诊断 现症诊断 一、病史、症状和体征 1、病史： 家族史、婚姻史、生育史  2、症状和体征： 特异性症候群：PKU、半乳糖血症、性染色体病 二、系谱分析 从先证者入手，调查其亲属的健康及生育状况，将调查材料绘制成系谱图进行系谱分析。 由于各种单基因遗传病常表现出特定的孟德尔式遗传，所以，系谱分析常有助于单基因病的诊断。 三、细胞遗传学检查 是较早应用于遗传病诊断的辅助手段，能较准确地判断和发现染色体数目和结构异常综合征，因而该方法是确诊染色体病的主要方法。  1．染色体检查  亦称核型分析（karyotype analysis） 是确诊染色体病的主要方法。随着显带技术的应用以及高分辩率染色体显带技术的出现和改进，能更准确地判断和发现更多的染色体数目和结构异常综合征，还可以发现新的微畸变综合征。 2．性染色质检查 ? 优点是方法简单，主要用于疑为两性畸形或性染色体数目异常的疾病诊断或产前诊断，有一定价值，但确认仍需依靠染色体检查。 3、染色体原位杂交： 应用标记的DNA片段与玻片上的细胞、染色体或间期核的DNA杂交，在样品核酸不改变其结构和分布格局的情况下，研究核酸片段的位置、相互关系。 4、荧光原位杂交（FISH）： 应用荧光素标记的DNA探针与标本进行原位杂交后，使杂交区域发出荧光。 优点：快速、安全 灵敏度高 特异性强。 图示为18三体综合征患者的FISH检测 染色体检查的指征： ①有明显的智力发育不全、生长迟缓或伴有其他先天畸形者；②夫妇之一有染色体异常，如平衡结构重排、嵌合体等；③家族中已有染色体或先天畸形的个体；④多发性流产妇女及其丈夫；⑤原发性闭经和女性不育症；⑥无精子症男子和男性不育症；⑦两性内外生殖畸形者；⑧疑为先天愚型的患儿及其父母；⑨原因不明的智力低下伴有大耳、大睾丸和（或）多动症者；⑩35岁以上的高龄孕妇（产前诊断）。 四、生化检查 生化检查主要用于生化遗传病的检测。主要针对三方面：1）蛋白、酶活性；2）反应底物、代谢中间产物或终产物的浓度；3）受体的结合能力。 例如疑为苯酮尿症患者，可检测血清苯丙氨酸或尿中苯乙酸浓度；粘多糖病可测定尿中硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素等。 五、基因诊断 采用分子生物学方法在DNA水平或RNA水平对某一基因进行分析，从而对特定的疾病进行诊断。 特 点： 针对直接病因诊断 特异性强，灵敏度高 适应性强，诊断范围广 目的基因是否处于活化状态均可，无组织和发育特异性。 在感染性疾病的基因诊断中，可检测正在生长的病原体或潜伏病原体。 基因诊断的样本： 可以是任何有核细胞，包括： 1、外周血白细胞、口腔粘膜细胞 2、活检标本、石腊包埋的组织块 3、沉淀细胞（唾液、痰液、尿液） 4、羊水细胞、绒毛细胞、 进入母体循环的胎儿细胞 应用PCR，样本可微量化到一个细胞 基因诊断的基本技术： 核酸分子杂交 聚合酶链反应PCR DNA测序技术 Southern blot印迹杂交 通过用已知基因的DNA片段制备探针与待测基因组DNA的限制性酶切片段进行杂交，分析带谱。 可直接确定致病基因的缺陷。是最经典、应用最广泛的分子遗传学技术。 常用于基因缺失。 限制性片段长度多态性（RFLP）分析： RFLP：DNA顺序上发生变化而出现或丢失某一限制性内切酶位点，使酶切产生的片段长度和数量发生变化。 RFLP分析：利用RFLP与DNA Southern印迹杂交结合对遗传病作出诊断和分析的方法。 镰状贫血的基因诊断： Polymerase Chain Reaction (PCR) A method to amplify specific genetic sequences. PCR Reagent Components Template (DNA or RNA) Two primers dNTPs PCR buffer KCl, Tris, MgCl2 Thermostable DNA Polymerase (Taq) PCR Cycle： Geometric Amplification： 基于PCR技术的DNA诊断 PCR直接扩增（大片段缺失） PCR/ASO、PCR/SSCP、PCR/DGGE联合应用（点突变的检测) PCR/Southern blot 联合应用（三核苷酸重复相关遗传病） PCR/ASO探针斑点杂交： 常用于检测点突变。 等位基因特异性寡核苷酸（ allele-specific oligonucleo