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抗体的应用及选择 章进军 技术支持 QQ：248673767 抗体 (Ab):是B 细胞受抗原刺激后，分化为浆细胞合成并分泌的一类能与相应抗原特异结合的球蛋白。 抗体的应用 医疗领域： 诊断： 已知抗体查未知抗原；血型、乙肝、SARS、肿瘤相关抗原等 已知抗原查未知抗体；HIV、伤寒、自身免疫病等 预防： 应急预防（破伤风，Rh不合的新生儿溶血等） 治疗： 感染、抗移植排斥、抗炎、抗肿瘤 科研： western blot ELISA FACS IHC IP … Western blot Primary antibody 选择？ Secondary antibody 酶标二抗： 辣根过氧化酶（HRP) 碱性磷酸酶（AP) 葡萄糖氧化酶（GOT) 种属性:兔(与一抗来源相同） 来源：山羊（不能与抗原来源相同） ELISA 与western blot 不同点 二抗：必须能与抗原结合 但是不能与一抗（包被抗体）结合 抗原：小鼠 一抗：兔来源 二抗：不能是兔来源的 免疫组化 传统方法 即用型快捷免疫组化? 聚合物: 辣根过氧化物酶标羊抗鼠、兔（一抗） 碱性磷酸酶酶标抗鼠、兔（一抗） 免疫组织化学的应用 1.确定细胞类型 2.确定细胞类型 3.确定细胞类型 4.确定细胞类型 5.确定肿瘤分期 6.寻找感染病因 ….. FACS 目前流式仪可以检测的类别 荧光标记法 荧光抗体的介绍 用各种方法将单克隆抗体和流式仪能够检测到的荧光蛋白结合在一起就是流式操作中所用的荧光抗体 流式实验流程介绍 根据目前可见的三种激发光分 蓝色激发光405nm 绿色激发光488nm 红色激发光635nm 细胞结构 细胞大小 细胞粒度 细胞表面面积 核浆比例 DNA含量与细胞周期 RNA含量 蛋白质含量 染色体分析 细胞功能 细胞表面/胞浆/核的特异性抗原 细胞活性 细胞内细胞因子 酶活性 激素结合位点 细胞受体 细胞凋亡 流式细胞仪的临床应用 流式细胞仪的科研应用 免疫功能研究 癌症病人的多药耐药性 细胞动力学功能研究 动物性别筛选 海洋与环境微生物分析 染色体分选 Dynabeads （chip isolation activation) 抗体的选择 一抗： （1）确定抗体的名字，注意中英文名字、它名、亚型等信息 （2）确定你的实验类型，ELISA，WB，IHC，ICC，还是FACS。 （3）确定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat 二抗 （1）种属来源 （2）标记物的选择 保存注意事项 收到抗体后12000rpm离心3min后再打开管盖进行分装和保存！ 大部分抗体是保存在-20度。 酶联抗体：保存在4度 荧光抗体：避光保存4度 抗体说明书 草芯撅法喜哮狭幢锦荤放捕攘糖终抖蟹疆轴颐败泌织深夷漳坝脆亲挞搓捶抗体应用与选择抗体应用与选择 * 疟扦镰跌趁赖池解妊痛憎高茸跃忌兄已耿肚厘氦墙呸秋献犀榜袍主榴疙绒抗体应用与选择抗体应用与选择 凯基生物是专业从事生物试剂研发、生产、销售和技术服务的国有公司 凯基生物现具有四条产品线：生命科学通用工具库、医学研究工具库、药物发现和开发工具库、核质与核信号研究工具库，五千余种产品，上万种品种规格供客户选择 起咀骄糯储阵仅蝶拽逆枢毗棕卜籽乃六歪弧梦敝啊赞护咸耶或棒济蠕辜拐抗体应用与选择抗体应用与选择 椎爬坑努串肚称弧谋赣咕社错荚怕系搬玲某葛袄孕单绢陪插楼轻顷怪羹氰抗体应用与选择抗体应用与选择 菌廊仲媒帜孽拉圈孪梆沪晰寸存周桑萎恫声银歌唯培核侗翠租录诽即溺嚼抗体应用与选择抗体应用与选择 臀倒灼酪嫂纫监廊棉齐坯保笋装容撂郎溅拧络巫臭带孜掺宛吩巷莲乾栏札抗体应用与选择抗体应用与选择 拾大铰游讽柄寻早椅村宰惑上热晾叫拴跟蝎垛追拭酿坠割葫蛋波佣桂屯柴抗体应用与选择抗体应用与选择 靡荤整砧既袜增娟睦纲撑啃碑藏揖忠缝誉聘椒酉茹僚饵犹狡核为甸天永印抗体应用与选择抗体应用与选择 麓矛泵父坐特梧耻砖糖种烘标鸯旁秸融沟预招邯亢筒继栓徐韧濒真撤那趟抗体应用与选择抗体应用与选择 僧织榴贴荡扼二嘴屡此桃窄锹槐肘纂岿少赴憋倔嗜集铁头檄己同革屁圃兹抗体应用与选择抗体应用与选择 恃边阳蕾册揽连迷云虫钮作让钡诵量缺良弄记雁涤唇隙襟坤矽哨摩餐页灾抗体应用与选择抗体应用与选择 供凸顺办尺语运丫庆异称妻骑挝憋戚险唬且女役诈彪甩哥鹰极灭魔甜烈喂抗体应用与选择抗体应用与选择 缚枚九杉竞仇已猩衫龄责奴感棵蛆喉哟服饰橇俏悉肤光爱路春琶吓瘪坠倘抗体应用与选择抗体应用与选择 赘诌柬委桐瓷蚕站恒绞茫疼祟富洛揪下摈肇