石柱黄连指纹图谱研究-仪器信息网.PDF

石柱黄连指纹图谱研究 黄小平+，李隆云，瞿显有，崔广林 (重庆市中药研究院，重庆400065) 摘要 目的：建立石柱道地药材黄连的HPLC指纹图谱，为科学评价与有效控制黄连质量提供新方法。方法： RP—HPLC法测定石柱GAP基地10批黄连样品。色谱条件：迪马DiamonsilC。。色谱柱，乙腈一0．05molfL磷酸二氢 am，流速0．8ml／min，柱温25。C。结果：10批黄连样品 钾(磷酸调pH值3)为流动相进行梯度洗脱，检测波长270 得到的指纹图谱有16个共有峰，通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较，11，12，13，14，15号峰分别为伪小檗 碱、药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱。结论：建立的HPLC指纹图谱分析法能较好反映黄连中的主要生物碱成分， 可用于黄连的质量控制。 关键词黄连；高效液相色谱法；指纹图谱 中图分类号：R282．71文献标识码：A 文章编号：1001掣54(2006)07-0666-04 黄连是我国著名常用中药，药典收载雅连、云连 碱、伪小檗碱由四川大学华西药学院提供。 和昧连三个品种，而商品黄连中味连占绝大部分。 样品：黄连样品来源见表1，均由本院生药室产 昧连主产于重庆石柱、巫溪，湖北利川、四川洪雅、大 地采集，李隆云教授鉴定为毛莨科植物黄连Coptis chinensis 邑等地，其中重庆石柱为黄连的传统道地产区，也是 Franch．的于燥根茎，即昧连，经低温干燥， 黄连的原产地保护区¨]。黄连的主要成分为药根 粉碎，过50目筛备用。 表1 黄连样品来源 碱(jatrorrhizine)、黄连碱(coptisine)、巴马汀(palma— tine)、小檗碱(berberine)、伪小檗碱(epiberberine) 等季胺型生物碱。一般用这些生物碱在生药中的含 量来评价黄连的质量，但单一成分难以反映黄连的 整体特征，建立简便可行的指纹图谱方法是目前更 好评价黄连质量的有效方法，也是中药标准化的一 项重要内容。目前，有报道用毛细管电泳法、高效液 相色谱法、红外光谱法和核磁氢谱法对黄连进行指 纹图谱研究心娟’，但有的方法难于推广，有的方法尚 不能完全分离6种主要生物碱成分。本研究采用反 相高效液相色谱法，对重庆石柱黄连GAP基地主要 生产点的样品进行研究，制定出石柱黄连的指纹图 谱。该方法简单可行，能完全分离黄连中的6个主 要生物碱成分。 2 方法与结果 1 仪器与材料 2．1 mm×250 谱柱(4．6 仪器：美国Waters高效液相色谱仪2695-996系 mm，5斗m)，检测波长为270 mol／ 统(含四元低压梯度泵，自动进样器，柱温箱，996二nm，柱温为25℃，进样量20斗l，以乙腈一0．05 L磷酸二氢钾(磷酸调pH值3)为流动相梯度洗脱， 级管阵列检测器)，Empower色谱工作站，Mille．Q 流速0．8 Plus超纯水机(美国密里博公司)，KQ-50B超声波mlfmin，梯度洗脱条件见表2。 清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。 2．2 对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的 试剂：乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均 对照品盐酸