靶向Wnt10b小干扰RNA抑制胚胎皮肤毛囊发育初步研究.pdfVIP

主堡墅堂丛型苤查!!!!堡!旦箜!!鲞堕!塑鱼!!!!望!!坠!!堡!!!!：!!!!!!!!：!!!堕!：! 39 实验论著· 靶向Wntl 0b的小干扰RNA抑制胚胎 皮肤毛囊发育的初步研究 纪影畅 李宇 鲁峰 胡志奇 王森 林常敏 高建华 【摘要】 目的利用小干扰RNA(siRNA)抑制皮肤Wntlob基因的表达，观察Wntlob基因沉 默能否抑制毛囊的发育并探讨其潜在机制。方法 化学合成siRNA—Wmlob，将siRNA转染体外培 养的胎鼠背部皮肤，荧光定量PCR检测转染后不同时间段皮肤组织Wntlob和B一连环蛋白(13一 catenin)mRNA的表达，Westernblot检测转染后72 h皮肤组织的Wntlob和3-catenin蛋白含量。将 转染后72 h的皮肤组织石蜡包埋、切片，HE染色，镜下观察各组毛囊发育情况并做统计学处理。结 果siRNA—Wntlob转染后的24、48 h，胎鼠背部皮肤WntlobmRNA的表达呈不同程度下降；但B． eatenin mRNA表达未随WntlobmRNA水平的起伏而明显波动；转染后72h，Wntlob蛋白和B． catenin的蛋白表达同时减少，新形成毛囊数量也随之减少(t=3．254，P=0．002)。结论在体外器 官培养的环境中，siRNA—Wntlob能够抑制胎鼠背部皮肤组织Wntlob蛋白的表达，减少新形成毛囊 的数量；Wntlob可能只在蛋白水平上调控细胞B—catenin的表达。 【关键词】 毛囊；形态发生；器官培养技术； RNA干扰 oninhibitionofthehair follicle siRNA WntlObinthe Preliminarystudy developmentby targeting culturedrat skin embryonicJl Yu，LU Sen，LIN Ying—chang，LIFeng，HUZhi—qi，WANG Chang— O Plastic Medical min，GAJian—hua．Departmentof Surgery，FirstAffiliatedHospital，ShantouUniversity 5 College，Shantou15041，China author：GAO CorrespondingJian—hua，Email：gaops哩厂@yahoo．corn．ca To whetherthe ofWntlobsiRNAcould 【Abstract】Objectiveinvestigate suppression by prevent the ofhairfollicleintheculturedrat skin．MethodssiRNA—Wntlobwas development embryonic method．ThedorsalskinofSDratat wereculturedinDMEMinthe synthesizedbychemosynthesis embryos DO【：10．3760／emaj．issn2012．01．011 学科研基金(A2009433) 作者单位：515041汕头，汕头大学医学院第一附属医院整形外科(纪影畅、李宇、王森、林常敏)；南方医科大学南方医院整形外科(鲁峰、 胡志奇、高建华) 通信作者：高