1基因工程工具的.ppt

基 因 工 程;每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。;基因工程的产物;又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性的技术。;基因工程的别名;基础理论和技术发展催生了基因工程;问题探讨：;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的关键步骤：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;思考：;(一)、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;(二)、“分子缝合针” —— DNA连接酶; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;　;（三）、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体;常用的载体：质粒;基因操作的基本步骤;剪切;步骤一：目的基因的获取;目的基因的提取方法;;1）反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然??在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;2）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ：;DNA合成仪;——基因工程的核心;2、基因表达载体的组成：;启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来; 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）;常用的受体细胞：;（一）转化： ;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;（2）基因枪法 （3）花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ; 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： ;步骤四：目的基因的检测与鉴定; 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。;（一）、检测（分子水平）;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;DNA分子杂交示意图 ;（二）、鉴定（个体生物学水平）;知识总结;DNA 重组技术的基本工具;限制性核酸内切酶;二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶;基因进入受体细胞的载体;基因工程的基本操作程序;;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;答案：（1）a a （2）基因枪法（花粉管通道法） （3）植物组织培养（1分） 脱分化（去分化） 再分化 （4）耐盐基因（目的基因） 一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中） ;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基