第四章 DNA复制 王诘腟.ppt

;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;DNA复制可能的三种方式;由Meselson和Stahl设计证明半保留复制的实验的被誉为生物学最美丽的实验;半保留复制实验;15N标记DNA移到14N标记DNA培养基中;氯化铯密度梯度超离心;Meselson 和Stahl的证明DNA半保留复制的实验流程 ;Meselson 和Stahl的实验结果;Meselson与Stalh在42年以后在最初他们相遇的一颗树下重逢时的合影;半保留复制的实验结果;半保留复制进一步的实验证椐;15N;Taylor以蚕豆根尖细胞为材料、使用放射性同位素证明真核细胞DNA也是半保留复制的实验。;DNA的半保留复制;某些生物DNA复制的引物序列 ;证明DNA复制的方向始终是5′→3′的末端终止实验 ;DNA复制起始区的特征;DNA复制起始区的特征;电镜下真核生物DNA的多个复制叉结构;复制叉的结构;真核生物DNA复制子;Cairns的实验;Cairns证明大肠杆菌DNA双向复制的实验;Reiji Okazaki的实验;Okazaki的脉冲标记和脉冲追踪的实验;脉冲标记;脉冲追踪;Okazaki的脉冲标记和脉冲追踪的实验结果分析;不连续复制;在复制叉中不连续合成的DNA片段称为冈崎片段，连续合成的DNA子链被称为前导链，不连续合成的DNA子链被称为后随链或滞后链。 ;由于细胞内都存在有dTTP和dUTP，而DNApolⅢ却并不能区分它们，因此也会将dUTP加入到DNA中，形成A·U对。那么在DNA中为什么没有U的存在呢？这是因为E.coli细胞里有双重“保险”，防止了U的“混入”。?? 第一道关是细胞里的dUTPase，它能使dUTP变成dUMP，dUMP是不能作为DNA合成的底物，这样它就不再能加入DNA中。但总还有些漏网之“鱼”，它们还是逃过此关，混入DNA中，这就靠第二道关来清除“异己”，这道关的主角是尿嘧啶N-糖苷酶（uracilN-glycosylase），它可以切断混合尿苷的糖苷键，形成无Pu和Py位点（apurinicorapyrimidinic，AP），再由AP内切酶在AP位点切出一个缺口，进一步进行切除修复。在细胞内尿嘧啶N-糖苷酶作用较快，而AP酶作用较慢，在新链合成之初约1200bp就有可能掺进一个U，但很快就被尿嘧啶N-糖苷酶切断糖苷键，在AP酶未作用前在脉冲标记实验中就提取了，用NaOH沉淀时，AP位点十分易断裂，所以前导链也成了小片段。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;ＤＮＡ复制的速度和方向;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;DNA复制过程的三个阶段;（一）DNA复制的起始阶段;1、DNA复制起始点的结构特性;2、DNA复制的方向性;3、DNA复制的起始;（二）DNA链的延长;1、DNA聚合酶;真核生物DNA聚合酶　;DNA聚合酶的性质;2、与超螺旋松驰有关的酶;（三）DNA复制的终止阶段　;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;“滚环复制”;滚环复制 ;D-环复制;D环复制 ;干细胞分裂过程中的“不朽链假说”;“不朽链假说”图解 ;原核生物DNA复制的特点;过程复杂；需要多种酶和蛋白质参与（包括拓扑异构酶、解旋酶、单链DNA结合蛋白、引物合成酶、DNA聚合酶及连接酶等）。;1. DNA复制